33.(12分)利用纤维素解决能源问题的关键,是高性能纤维素酶的获取。请完善实验方案,并
回答相关问题。
实验目的:比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性。
实验原理:纤维素酶催化纤维素分解为葡萄糖,用葡萄糖的产生速率表示酶活性大小;用呈色反应表示葡萄糖的生成量。
实验材料:三种微生物(A-C)培养物的纤维素酶提取液,提取液中酶蛋白浓度相同。
实验步骤:
(1)取四支试管,分别编号。
(2)在下表各列的一个适当位置,填写相应试剂的体积量,并按表内要求完成相关操作。
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试剂(mL) |
1号试管 |
2号试管 |
3号试管 |
4号试管 |
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蒸馏水 |
1.4 |
1.4 |
1.4 |
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pH7.5的缓冲液 |
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0.2 |
0.2 |
0.2 |
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纤维素悬浮液 |
0.3 |
0.3 |
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0.3 |
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微生物A提取液 |
0.1 |
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微生物B提取液 |
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微生物C提取液 |
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0.1 |
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总体积 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
(3)将上述四支试管放入37℃的水浴,保温1小时。
(4)在上述四支试管中分别加入 试剂,摇匀后,进行 处理。
(5)观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅。
实验结果:
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微生物A提取物 |
微生物B提取物 |
微生物C提取物 |
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颜色深浅程度 |
+ |
+++ |
++ |
分析讨论:
(1)该实验中的对照组是 号试管。
(2)实验组试管均呈现的颜色是 ,但深浅不同。
(3)上述结果表明:不同来源的纤维素酶,虽然酶蛋白浓度相同,但活性不同。若不考虑酶的最适 和最适 的差异,其可能原因是不同酶的 不同。
(4)你认为上述三种微生物中,最具有应用开发价值的是 。