37．（8分）大肠杆菌pUC18质粒是基因工程中常用的运载体。某限制酶在此质粒上的唯一酶切位点位于LacZ基因中，如果没有插入外源基因，LacZ基因便可表达出口一半乳糖苷酶。当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会被β一半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之，则形成白色菌落。下图表示利用此质粒实施基因工程的主要流程。

       请分析并回答：

   （1）已获得的目的基因可利用    技术进行扩增。

   （2）目的基因插入质粒构建重组质粒的过程中，需要DNA连接酶恢复       键。

   （3）将试管I中的物质和大肠杆菌共同置于试管Ⅱ的目的是        ；大肠杆菌需事先用Ca²⁺进行处理，目的是         。

   （4）将试管Ⅱ中的菌液接种于选择培养基上培养，培养基中应含有大肠杆菌必需的营养物质包括    和生长因子，还应加入IPTG、X-gal以及氨苄青霉素，其中加入氨苄青霉素的作用是筛选出        。

   （5）若观察到培养基上出现    色菌落，则说明大肠杆菌中已成功导入了重组质粒。如果作为受体细胞的大肠杆菌也含有LacZ基因，则不利于重组质粒的筛选，原因是          。

下图a示基因工程中经常选用的运载体——pBR322质粒，Amp^r表示氨苄青霉素抗性基因，Tet^r表示四环素抗性基因。目的基因如果插入某抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性。为了检查运载体是否导入原本没有Amp^r 和Tet^r的大肠杆菌（受体细胞），将大肠杆菌涂布在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图b的结果（黑点表示菌落）。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图c的结果（空圈表示与b对照无菌落的位置）。据此分析并回答：

（1）pBR322质粒的化学本质是___________，其控制着___________等性状。该基因工程中，质粒上的Amp^r．Tet^r称为___________基因。

（2）与图c空圈相对应的图b中的菌落表现型是______________________，由此说明目的基因插入了___________中。此大肠杆菌导入了________（填重组．没有重组）质粒。

（1）pBR322质粒的化学本质是___________，其控制着___________等性状。该基因工程中，质粒上的Amp^r．Tet^r称为___________基因。

（2）与图c空圈相对应的图b中的菌落表现型是______________________，由此说明目的基因插入了___________中。此大肠杆菌导入了________（填重组．没有重组）质粒。