目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒，pBR322质粒是较早构建的质粒载体，其主要结构如图一所示。

（1）建构基因表达载体时，必须有               、复制原点、目的基因、终止子以及                                    。

（2）构建人工质粒时要有抗性基因，以便于                    。

（3）pBR322分子中有单个EcoRI限制酶作用位点，EcoRl只能识别序列—GAATTC一，并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoRl的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端                   。

（4）pBR322分子中另有单个的BamHI限制酶作用位点，现将经BamHI处理后的质粒与用另一种限制酶BglⅡ处理得到的目的基因，通过DNA连接酶作用恢复         ，成功获得了重组质粒。说明                         。

（5）为了检测上述重组质粒是否导入原本无amp^R和tet^R的大肠杆菌，将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落；再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果（空圈表示与图二对照无菌落的位置）。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是            。图三结果显示，多数大肠杆菌导入的是                 。

Ⅰ、在某生物细胞培养液中加入用³H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸，短暂培养一段时间后，洗去³H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸。使在该段时间内已处于DNA复制期不同阶段的全部细胞中DNA被³H标记，而当时处于其它时期的细胞则不带标记。间期分为  G1期（DNA复制前期），S期（DNA复制期,占间期的大部分时间）， G2期（DNA复制后期），不同时间取样做细胞放射性自显影，找出正处于有丝分裂的M期 (分裂期)细胞，计算其中带³H标记的细胞占所有细胞的百分数。得到下图（图1～图4中横轴为时间，纵轴为带标记细胞占总细胞数的百分数）：回答各时期均用字母表示

（1）图2中a点开始检测到带³H标记分裂期细胞，则o-a为___________期
（2）图2中b点带³H标记分裂期细胞数开始达到最大值，则a-b段表示   期。
（3）图3中c点时，带标记的细胞百分数开始下降，则a-c段表示什么时期：_________
（4）此后，带标记的分裂期细胞数逐渐减少，直到消失，到第二次出现带有标记的细胞数时为图表中e点，则一个完整的细胞周期的时间为：                     。
Ⅱ、操纵元是原核细胞基因表达调控的一种组织形式，它由启动子、结构基因，(编码蛋白基因)、终止子等部分组成。如图表示大肠杆菌细胞中核糖体蛋白(RP)合成及调控过程，图中①②表示相关生理过程，mRNA上的RBS是核糖体结合位点。请回答下列问题：

(1)启动子的基本组成单位是           ，
(2)过程①进行的场所是        ，RPl中有一段氨基酸序列为“一丝氨酸一组氨酸一谷氨酸一”，转运丝氨酸、组氨酸和谷氨酸的tRNA上的反密码子分别为AGA、GUG、CUU，则基因1中决定该氨基酸序列的模板链碱基序列为          。
(3)图示表明，当细胞中缺乏足够的rRNA分子时，核糖体蛋白RPl能与mRNA分子上的RBS位点结合，从而导致mRNA      ，终止核糖体蛋白的合成。这种调节机制 既保证细胞内rRNA与核糖体在数量上的平衡，又可以减少       。
(4)大豆中的一种成分——染料木黄酮因能抑制rRNA形成而成为抗癌药物的成分，试结合题中信息分析染料木黄酮抗癌的机理                               。

Ⅰ、在某生物细胞培养液中加入用³H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸，短暂培养一段时间后，洗去³H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸。使在该段时间内已处于DNA复制期不同阶段的全部细胞中DNA被³H标记，而当时处于其它时期的细胞则不带标记。间期分为  G1期（DNA复制前期），S期（DNA复制期,占间期的大部分时间）， G2期（DNA复制后期），不同时间取样做细胞放射性自显影，找出正处于有丝分裂的M期 (分裂期)细胞，计算其中带³H标记的细胞占所有细胞的百分数。得到下图（图1～图4中横轴为时间，纵轴为带标记细胞占总细胞数的百分数）：回答各时期均用字母表示

（1）图2中a点开始检测到带³H标记分裂期细胞，则o-a为___________期

（2）图2中b点带³H标记分裂期细胞数开始达到最大值，则a-b段表示   期。

（3）图3中c点时，带标记的细胞百分数开始下降，则a-c段表示什么时期：_________

（4）此后，带标记的分裂期细胞数逐渐减少，直到消失，到第二次出现带有标记的细胞数时为图表中e点，则一个完整的细胞周期的时间为：                     。

Ⅱ、操纵元是原核细胞基因表达调控的一种组织形式，它由启动子、结构基因，(编码蛋白基因)、终止子等部分组成。如图表示大肠杆菌细胞中核糖体蛋白(RP)合成及调控过程，图中①②表示相关生理过程，mRNA上的RBS是核糖体结合位点。请回答下列问题：

(1)启动子的基本组成单位是           ，

(2)过程①进行的场所是        ，RPl中有一段氨基酸序列为“一丝氨酸一组氨酸一谷氨酸一”，转运丝氨酸、组氨酸和谷氨酸的tRNA上的反密码子分别为AGA、GUG、CUU，则基因1中决定该氨基酸序列的模板链碱基序列为          。

(3)图示表明，当细胞中缺乏足够的rRNA分子时，核糖体蛋白RPl能与mRNA分子上的RBS位点结合，从而导致mRNA      ，终止核糖体蛋白的合成。这种调节机制 既保证细胞内rRNA与核糖体在数量上的平衡，又可以减少       。

(4)大豆中的一种成分——染料木黄酮因能抑制rRNA形成而成为抗癌药物的成分，试结合题中信息分析染料木黄酮抗癌的机理                               。