摘要: 两种不同的DNA分子被同一种限制酶切割后.两者的黏性末端碱基配对是在DNA连接酶的作用下实现的吗?

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Ⅰ、(4分)限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—GGATCC—,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。
③在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来?为什么?
Ⅱ、(6分)甲图是测量种子萌发时锥形瓶中气体体积变化的实验装置。锥形瓶中放的种子事先用水浸泡过并在稀释的消毒剂中清洗过(不影响种子生命力)。实验开始时U形管左侧与右侧液面相平,每隔半小时利用标尺量出右侧管内的液面高度变化,实验结果见乙图。回答下列问题:

(1)种子为什么要在稀释的消毒剂中清洗_______________________________。
(2)此实验的实验目的是___________________________。
(3)分析0~3.5小时内气体体积变化原因___________________。分析3.5小时~4小时内标尺读数没增加最可能的原因______________________。
(4)本实验存在的问题是没有设计对照实验,因此实验数据不能准确反映真实情况。请设置此实验的对照实验_____________________。
⑸由于外界温度、压强的改变导致气体体积改变,在对照实验中气体体积变化在2小时是+0.2个单位,那么同等条件下萌发的种子此时实际呼吸速率是______单位/小时。

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Ⅰ、(4分)限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—GGATCC—,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。

③在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来?为什么?

Ⅱ、(6分) 甲图是测量种子萌发时锥形瓶中气体体积变化的实验装置。锥形瓶中放的种子事先用水浸泡过并在稀释的消毒剂中清洗过(不影响种子生命力)。实验开始时U形管左侧与右侧液面相平,每隔半小时利用标尺量出右侧管内的液面高度变化,实验结果见乙图。回答下列问题:

(1)种子为什么要在稀释的消毒剂中清洗_______________________________。

(2)此实验的实验目的是___________________________。

(3)分析0~3.5小时内气体体积变化原因___________________。分析3.5小时~4小时内标尺读数没增加最可能的原因______________________。

(4)本实验存在的问题是没有设计对照实验,因此实验数据不能准确反映真实情况。请设置此实验的对照实验_____________________。

⑸由于外界温度、压强的改变导致气体体积改变,在对照实验中气体体积变化在2小时是+0.2个单位,那么同等条件下萌发的种子此时实际呼吸速率是______单位/小时。

 

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Ⅰ、(4分)限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—GGATCC—,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。

③在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来?为什么?

Ⅱ、(6分) 甲图是测量种子萌发时锥形瓶中气体体积变化的实验装置。锥形瓶中放的种子事先用水浸泡过并在稀释的消毒剂中清洗过(不影响种子生命力)。实验开始时U形管左侧与右侧液面相平,每隔半小时利用标尺量出右侧管内的液面高度变化,实验结果见乙图。回答下列问题:

(1)种子为什么要在稀释的消毒剂中清洗_______________________________。

(2)此实验的实验目的是___________________________。

(3)分析0~3.5小时内气体体积变化原因___________________。分析3.5小时~4小时内标尺读数没增加最可能的原因______________________。
(4)本实验存在的问题是没有设计对照实验,因此实验数据不能准确反映真实情况。请设置此实验的对照实验_____________________。

⑸由于外界温度、压强的改变导致气体体积改变,在对照实验中气体体积变化在2小时是+0.2个单位,那么同等条件下萌发的种子此时实际呼吸速率是______单位/小时。

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根据模拟制作重组DNA分子的活动,甲DNA分子、乙DNA分子被EcoRI酶切后,即可获得所需的目的基因和质粒,回答以下问题:(已知EcoRI酶识别序列为GAATTC,识别位点为G||A)

(1)绿色硬纸板(甲DNA分子)的碱基序列为:      

……ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC……     

……TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATAC……

红色硬纸板(乙DNA分子)的碱基序列为:

  ……TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG……      

……AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG……      

其中,           DNA分子含有“目的基因”,            DNA分子是“质粒”。

(2)用剪刀代表进行切割。酶切位点在         (a处还是b处),此化学键称为              。

(3)请用“||”在甲、乙两DNA分子上标出EcoRI的作用位点。

    

(4)从基因文库中获取目的基因是常用方法,基因文库实际上就是指导入了某种生物不同基因的许多DNA片断的                         的群体。按照其中所含基因的量又可分为               文库和              文库。

(5)基因表达载体的构建是基因工程的关键步骤之一,请根据所给的条件完成下列问题:

     已知有4种限制性核酸内切酶,其中1号和4号切割DNA后产生的是平末端,2和3号酶产生的是黏性末端。含目的基因的DNA片段和质粒的酶切序列如下图所示:

 

 

① 请设计酶切方案,构建最佳基因表达载体(重组质粒)                                                                     

②该重组质粒上有几个复制原点:    ,能用PCR技术扩增吗      (能或不能)

③若用酶2和3切割重组质粒,可以得到几个DNA片段:        

  若用酶2和1切割重组质粒,可以得到几个DNA片段:        

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