题目内容
根据模拟制作重组DNA分子的活动，甲DNA分子、乙DNA分子被EcoRI酶切后，即可获得所需的目的基因和质粒，回答以下问题：（已知EcoRI酶识别序列为GAATTC，识别位点为G||A）
（1）绿色硬纸板（甲DNA分子）的碱基序列为：
……ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC……
……TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATAC……
红色硬纸板（乙DNA分子）的碱基序列为：
……TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG……
……AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG……
其中， DNA分子含有“目的基因”， DNA分子是“质粒”。
（2）用剪刀代表进行切割。酶切位点在 （a处还是b处），此化学键称为 。
（3）请用“||”在甲、乙两DNA分子上标出EcoRI的作用位点。
（4）从基因文库中获取目的基因是常用方法，基因文库实际上就是指导入了某种生物不同基因的许多DNA片断的 的群体。按照其中所含基因的量又可分为 文库和 文库。
（5）基因表达载体的构建是基因工程的关键步骤之一，请根据所给的条件完成下列问题：
已知有4种限制性核酸内切酶，其中1号和4号切割DNA后产生的是平末端，2和3号酶产生的是黏性末端。含目的基因的DNA片段和质粒的酶切序列如下图所示：
① 请设计酶切方案，构建最佳基因表达载体（重组质粒） 。
②该重组质粒上有几个复制原点： ，能用PCR技术扩增吗 （能或不能）
③若用酶2和3切割重组质粒，可以得到几个DNA片段： 。
若用酶2和1切割重组质粒，可以得到几个DNA片段： 。
（1）乙， 甲．
（2）a处， 磷酸二酯键
（3） 绿色硬纸板（DNA分子甲）的碱基序列为：（2分）
……ATAGCATGCTATCCATG|| AATTCGGCATAC……
……TATCGTACGATAGGTACTTAA||GCCGTATG……
红色硬纸纸（DNA分子乙）的碱基序列为：
……TCCTAG||AATTCTCGGTATG||AATTCCATAC……
……AGGATCTTAA||GAGCCATACTTAA||GGTATG……
（4）受体菌 基因组 部分基因
（5) ①目的基因：用酶2和4切割，质粒用酶1和2切割，由于1和4切出的是平末端，可以相连，因而目的基因可以与质粒重组。
②一个 不能
③2个 1个
