摘要: 分离和纯化分:采用透析和离心的方法.

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红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成,血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题:

(1)血红蛋白提取和分离的程序可分为四步:________、________、________和________。

(2)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。

①加入柠檬酸钠的目的是__________________________________________________。

②在样品处理中包括红细胞的洗涤、______________________________________、分离血红蛋白溶液、透析。

③洗涤红细胞的目的是________________,你如何知道红细胞已洗涤干净?

________________________________________________________________________

④分离红细胞时对离心速度和离心时间的要求是______________________________

________________________________________________________________________。

⑤若离心速度过高和时间过长结果会怎样?_________________________________。

(3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析,这就是样品的粗分离。

①透析的目的是_________________________________________________________。

②透析的原理是__________________________________________________________。

(4)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化,最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。

①样品纯化的目的是_______________________________________________________。

②血红蛋白有什么特点?___________________________________________________。

这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义?

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

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红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成,血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题:

(1)血红蛋白提取和分离的程序可分为四步:________、________、________和________。

(2)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。

①加入柠檬酸钠的目的是__________________________________________________。

②在样品处理中包括红细胞的洗涤、______________________________________、分离血红蛋白溶液、透析。

③洗涤红细胞的目的是________________,你如何知道红细胞已洗涤干净?

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④分离红细胞时对离心速度和离心时间的要求是______________________________

________________________________________________________________________。

⑤若离心速度过高和时间过长结果会怎样?_________________________________。

(3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析,这就是样品的粗分离。

①透析的目的是_________________________________________________________。

②透析的原理是__________________________________________________________。

(4)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化,最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。

①样品纯化的目的是_______________________________________________________。

②血红蛋白有什么特点?___________________________________________________。

这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义?

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