题目内容
【题目】某兴趣小组进行探究“培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系”实验，用血 细胞计数板计数酵母菌数量。血细胞计数板是一个特制的可在显微镜下观察的玻璃制品，样品滴在计数室内。计数室由25个中格、每个中格由16个小格组成，每个汁数室容纳 液体的总体积为0.1mm3。操作如下：
第一步：配制5%葡萄糖培养液500mL。
第二步：将500mL5%的葡萄糖培养液置于锥形瓶中，把0.lg活性千酵母加入5%葡萄糖溶液中，25℃下恒温培养。
第三步：连续7天，每天随机抽时间取样，用血球计数板计数酵母菌数量，每次重复3次，求平均值，并做好记录。
第四步：根据记录的实验结果，画出酵母菌种群数量与时间的变化曲线。
回答下列问题：
（1）指出并改正实验操作识骤第三步中的一处错错误_______________。
（2）本实验过粒中，封培养液中的酵母菌逐个计数是非常常困难的，可以采用___________法。
（3）从试管中吸出培养液迸行计数之前，需将试管轻轻振荡几次，以保证估算的准确性，减少误差。如果取样前没有振荡试管，直接取上层培养液，观察得到的数据的误差是___________（填“偏大”或“偏小”）。
（4）某同学第5d在使用血球计数板计数时做法如下：
①振荡摇匀试管，取1mL培养液并稀释100倍，稀释样液的无菌水中加入了几滴台朌蓝染液。
②先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取稀释后的培养液滴边緣，让培养液自行渗入，多余培养液渗入___________，制作好临时装片。
③显微镜下观察并计数：在观察汁数时只统计___________（填“被”或“不被”）染成蓝色的酵母菌。如果一个小格内酵母菌过多，难以数清，则应当将样液适当___________再计数。
④下图1所示为视野内一个小格（“●”代表活的酵母菌），该小格中酵母菌数量为__________个。下图2所示的a、h、c、d、e5个中格（80个小格）内若有活的酵母菌40个，则lmL酵母菌培养液样品中菌体数最接近__________个。
（5）拫据每天测量的教据描绘出的酵母菌种群数量变化呈S型增长，培养后期菌群数量下降可能的原因是__________。
【答案】随机抽时间取样改为定时取样； 抽样检测 偏小 （凹）槽内 不被 释稀 6 2×106 营养物质逐渐被消耗、pH改变、有害物质的积累等
【解析】
本题考查了探究培养液中酵母菌种群数量的变化的实验方面的相关知识，要求考生掌握调查的方式和实验过程中的相关注意点；学会酵母菌计数的方法，并能利用公式对数量进行计算，难度适中．
（1）该实验的自变量是时间，为了控制单一变量，应将随机抽时间取样改为定时取样。
（2）培养液中酵母菌的数量比较多，逐个计数是非常困难的，通常采用抽样检测法进行计数是，使用血细胞计数板进行计数。
（3）从试管中吸出培养液进行计数之前，需将试管轻轻振荡几次，以保证估算的准确性，减少误差。如果取样前没有振荡试管，酵母菌细胞在底部，直接取上层培养液，观察得到的数据的误差是偏小。
（4）①振荡摇匀试管，取1mL培养液并稀释100倍，稀释样液的无菌水中加入了几滴台盼蓝染液。
②先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取稀释后的培养液滴于其边缘，让培养液自行渗入，否则计数偏大，多余培养液渗入(凹)槽内，作好临时装片。
③显微镜下观察计数，由于台盼蓝可以将死的酵母菌染成蓝色，死亡的细胞膜失去了选择透过性，活的酵母菌仍为无色，因此在观察计数时只统计不被染成蓝色的酵母菌，如果一个小格内酵母菌过多，难以数清，则应当将样液适当稀释再计数。
④压在方格线上的细胞只计相邻两边及其夹角上的细胞数，压在方格线上左线和上线及夹角的细胞数共3个，方格内细胞数是3个，因此该中格内酵母菌数量应计为6个。图2所示的a、b、c、d、e5个中格(80个小格)内若有活的酵母菌40个，1mL=1cm3=1000mm3，1mL酵母菌培养液样品中菌体数约为(1000mm3/0.1mm3)×25×(40/5)=2×106。
（5）根据每天测量的数据描绘出的酵母菌种群数量变化呈S型增长，培养后期由于营养物质被消耗、pH改变、有害物质的积累等原因导致菌群数量下降。
