Question

【题目】科学家研究表明，新冠病毒是蛋白质包裹的单链RNA病毒，通过刺突蛋白（S蛋白）与人的ACE2受体识别结合，来感染人的呼吸道上皮细胞。请回答下列问题：

（1）获取病毒RNA后，采用___________法得到cDNA，再利用PCR技术扩增S蛋白基因，扩增前要根据一段目的基因的核苷酸序列合成引物，PCR中需要引物的原因是___________________。

（2）科学家利用S蛋白刺激实验动物的免疫系统，获取___________，用于新冠病毒的检测及筛查。

（3）将重组质粒导入受体细胞后，首先要检测________，这是目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键。检测的方法是DNA分子杂交技术，即在含有目的基因的片段上用____________等做标记，以此作为探针来检测。

（4）用荧光探针检测目的基因时，先将探针与染色体共同煮沸，使DNA双链中_________断裂，形成单链。随后在降温复性过程中，探针的碱基依据___________________，与染色体上的特定基因序列形成较稳定的杂交分子。两条姐妹染色单体中最多可有________________条荧光标记的DNA片段。

Answer 1

【答案】逆转录 DNA聚合酶不能从头开始合成DNA， 而只能从3'端延伸DNA链 单克隆抗体（或抗体） 转基因生物的DNA上是否插入了目的基因 放射性同位素 氢 碱基互补配对原则 4

【解析】

目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原-抗体杂交技术。

（1）获取病毒RNA后，采用逆转录法得到cDNA，再利用PCR技术扩增S蛋白基因，由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA， 而只能从3'端延伸DNA链，所以扩增前要根据一段目的基因的核苷酸序列合成引物。

（2）科学家利用S蛋白刺激实验动物的免疫系统，获取抗S蛋白的抗体，用于新冠病毒的检测及筛查。

（3）目的基因在受体细胞中稳定遗传的关键是将目的基因插入到受体细胞的DNA上，使目的基因能随受体细胞的DNA复制而复制，所以将重组质粒导入受体细胞后，首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，检测的方法是DNA分子杂交技术，即在含有目的基因的片段上用放射性同位素等做标记，以此作为探针来检测。

（4）加热可使DNA双链中氢键断裂，从而形成单链。在降温复性过程中，探针的碱基依据碱基互补配对原则，与染色体上的特定基因序列形成较稳定的杂交分子。两条姐妹染色单体中共含有四条DNA单链，故最多可有4条荧光标记的DNA片段。