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【题目】科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS),继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠,流程如下:

(1)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称为______________,培养的细胞在贴壁成长至铺满培养皿底时停止分裂,这种现象称为______________

(2)图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得,该过程称为______________;也可从灰鼠体内取出卵子,通过______________后进行早期胚胎培养获得。早期胚胎培养的发育培养液中含有的成分是无机盐、_________、氨基酸、核苷酸、维生素、激素以及____________等。

(3)图中重组囊胚通过______________技术移入白鼠子宫内继续发育,暂不移入的胚胎可使用______________方法保存。

(4)小鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的______________分离培养获得。iPS与ES细胞同样具有发育全能性,有望在对人类iPS细胞进行定向____________后用于疾病的细胞治疗。

【答案】1)原代培养 接触抑制

2)冲卵(或冲胚) 体外受精(或核移植) 有机盐类 动物血清

3)胚胎移植 冷冻(或低温)

4)内细胞团 诱导分化

【解析】

哺乳动物的胚胎干细胞简称ESEK细胞,来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来,具有胚胎细胞的特性,在形态上表现为体积小,细胞核大,核仁明显;在功能上,具有发育的全能性,可分化为成年动物体内任何一种组织细胞;另外,在体外培养的条件下,可以增殖而不发生分化,可进行冷冻保存,也可进行遗传改造。据图分析,从黑鼠体内获得体细胞后,诱导分化形成多能干细胞;从灰鼠体内提取出2-细胞胚胎,经过特殊处理形成囊胚,将多能干细胞移植到囊胚的内细胞团,形成重组胚胎,移植到白鼠子宫,形成克隆鼠。

1)原代培养指将动物组织用酶处理成单个细胞后进行的原代培养,贴壁的细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖的现象称为接触抑制。

2)将早期胚胎从小鼠输卵管或母牛子宫中冲洗出来的方法叫冲卵;也可从灰鼠体内取出卵子,通过体外受精后进行早期胚胎培养获得。发育培养液中的成分除了无机盐、氨基酸、核苷酸、维生素、激素外,还需要有机盐类、动物血清等。

3)图中重组囊胚通过胚胎移植技术移入白鼠子宫内继续发育,暂不进行胚胎移植的胚胎可放入-196℃的液氮中冷冻保存。

4)小鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的内细胞团分离培养获得。iPSES细胞同样具有发育全能性,有望在对人类iPS细胞进行定向诱导分化后用于疾病的细胞治疗。

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