Question

【题目】环境污染物多聚联苯（C12H10-xClx）难以降解，受其污染的土壤中常有重金属污染同时存在。研究发现联苯降解菌内的联苯水解酶是催化多聚联苯降解的关键酶。回答下列问题：

（1）为了从富含多聚联苯的环境中分离联苯降解菌，培养基中加入多聚联苯作为__________，该培养基属于__________（填“选择”或“鉴定”）培养基。

（2）若要对所分离的菌种进行计数，除显微镜直接计数法以外还常用_______________法接种来进行活菌计数，其原理是__________________________。

（3）若从联苯降解菌中分离并得到纯度较高的联苯水解酶（蛋白质），分离该酶常用的方法是_______法，采用该方法先分离出的是相对分子质量______（填“较大”或“较小”）的蛋白质。

（4）联苯降解酶在实验室里的降解率很高，但是实际污染环境的治理中降解率很低，这可能是因为________________。

Answer 1

【答案】唯一碳源 选择 稀释涂布平板 在稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落来源于（稀释液中的）一个活菌 凝胶色谱 较大 实际污染环境中多聚联苯不是唯一碳源，或其他环境条件导致联苯水解酶的活性降低

【解析】

1、培养基按功能分：

选择培养基：培养基中加入某种化学成分根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率，如加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌；

鉴别培养基：加入某种试剂或化学药品依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计鉴别和区分菌落相似的微生物，如伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌。

2、凝胶色谱法的原理：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。

（1）为了从富含多聚联苯的环境中分离联苯降解菌，应该用以多聚联苯作为唯一碳源的选择培养基。

（2）在对所分离的菌种进行计数时，除用显微镜直接计数法以外还常用稀释涂布平板法接种来进行活菌计数，因为在稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落可认为来源于（稀释液中的）一个活菌。

（3）纯化该酶常用的方法是凝胶色谱法，该方法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此采用该方法先分离出分子质量较大的蛋白质。

（4）由于在实际污染环境中多聚联苯不是唯一碳源，或其他环境条件导致联苯水解酶的活性降低，因此会出现联苯降解酶在实验室里的降解率很高，但是实际污染环境的治理中降解率很低的现象。