题目内容
【题目】阅读以下材料回答下列小题
乙型脑炎病毒（JEV）是一种RNA病毒，病毒的E蛋白参与病毒复制过程。研究人员利用 基因重组的方法构建了二种新型JEV疫苗：DNA疫苗和E蛋白疫苗。图示主要流程。
【1】研究发现：受体细胞为大肠杆菌或酵母菌时，所形成的E蛋白结构不完全相同，最可能的原因是：（ ）
A.两种受体细胞在基因表达时所使用的密码子不同
B.大肠杆菌无细胞核，酵母菌有细胞核可进行基因转录
C.大肠杆菌无膜结构的细胞器，无法对蛋白质进一步加工
D.两种受体细胞在基因表达时所遵循的碱基互补配对原则不同
【2】①代表什么过程，②所需要的酶是 （ ）
A.转录 DNA聚合酶与DNA连接酶
B.逆转录 逆转录酶与RNA聚合酶
C.翻译 DNA聚合酶与RNA聚合酶
D.逆转录 限制酶与DNA连接酶
【3】如图表示N质粒和成功导入E蛋白基因的质粒EN。为筛选含EN的菌落，可用含不同抗生素：氨苄青霉素和四环素的平板培养基进行筛选，现得到A、B、C三类菌落，生长情况如表。（“+”代表生长，“-”代表不生长）据图和表分析，不能得出的结论是（ ）
平 板 菌 落 | A | B | C |
无抗生素 | + | + | + |
氨苄青霉素 | + | + | - |
四环素 | + | - | - |
氨苄青霉素+四环素 | + | - | - |
A.A菌落细胞被导入了N质粒B.两种抗生素均能抑制E蛋白表达
C.C菌落细胞未被导入任何质粒D.B菌落细胞被导入EN质粒
【答案】
【1】C
【2】D
【3】B
【解析】
基因表达载体的基本结构包括复制原点、目的基因、标记基因、启动子、终止子等。根据题干信息和图形分析，N是载体质粒，其含有的氨苄青霉素抗性基因（ampr）和四环素抗性基因（tetr）都属于标记基因，可以用检测目的基因是否导入受体细胞；EcoRV酶为限制酶，其切割质粒后会破坏了四环素抗性基因（tetr）。
【1】A、自然界所有生物共有一套密码子，A错误；
B、大肠杆菌和酵母菌都可进行基因转录，B错误；
C、大肠杆菌属于原核生物，酵母菌属于真核生物，由于大肠杆菌没有膜结构的细胞器，无法对蛋白质进一步加工，故当受体细胞为大肠杆菌或酵母菌时，所形成的E蛋白结构不完全相同，C正确；
D、两种受体细胞在基因表达时所遵循的碱基互补配对原则相同，D错误。
故选C。
【2】乙型脑炎病毒RNA经逆转录可得①cDNA；将E蛋白基因和N质粒连接需用②限制酶和DNA连接酶，故选D。
【3】根据表格分析，A类菌落在氨苄青霉素和四环素的培养基中都能够生长，说明其导入的是N；B类菌落在氨苄青霉素的培养基中能生长，说明B菌落细胞被导入 EN 质粒；C类菌落在任何抗生素的培养基中都不能生长，说明其没有导入任何质粒，两种质粒中含有氨苄青霉素抗性基因（ampr）和四环素抗性基因（tetr），能表达产生相应的抗生素，但E蛋白基因的表达与两种抗生素无关，因此ACD都能推出，B符合题意，故选B。
解答本题的关键是识记并理解基因工程的四个基本步骤，尤其是对核心步骤-构建基因表达载体步骤的理解，明确基因表达载体的几个必须的成分及其作用，进而结合题干要求分析答题。
