题目内容
【题目】萌发的小麦种子中的淀粉酶主要有α-淀粉酶(在 pH<3.6 时迅速失活,但耐热)、β-淀粉酶(不耐 热,70℃条件下 15min 后就失活,但耐酸)。以下是以萌发的小麦种子为原料来测定α-淀粉酶催化效率的实验, 请回答下列与实验相关的问题。
[实验目的]测定 40℃条件下α-淀粉酶的催化效率。
[实验材料]萌发 3 天的小麦种子。
[主要器材]麦芽糖标准溶液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅、试管等。
[实验步骤]
(1)制备不同浓度麦芽糖溶液,与斐林试剂生成标准颜色。取 7 支洁净试管编号,按下表中所示加入试剂,而后 将试管置于 60℃水浴中加热 2min,取出后按编号排序。
表中 Z 代表的数值是。
(2)以萌发的小麦种子制取淀粉酶溶液,将装有淀粉酶溶液的试管置于,取出后迅速冷却,得到α-淀粉酶溶液。
(3)取 A、B、C、D 四组试管分别作以下处理:
(4)将 Al 和 Bl 试管中溶液加入到 E1 试管中,A2 和 B2 溶液加入到 E2 试管中,A3 和 B3 溶液加入到 E3 试管中.C、 D 试管中的溶液均加入到 F 试管中,立即将 E1、E2、E3、F 试管在 40℃水浴锅中保温一段时间。然后分别加入 2mL 斐林试剂,并经过 60℃水浴中加热 2min 后,观察颜色变化。
[结果分析]将 E1、E2、E3 试管中的颜色与试管进行比较得出麦芽糖溶液浓度,并计算出α-淀粉酶催化效率前平均值。
[讨论]
①实验中 F 试管所起的具体作用是排除对实验结果的干扰,从而对结果进行校正。
②若要测定β- 淀粉酶的活性,则需要对步骤二进行改变,具体的操作是将淀粉酶溶液,从而获得β-淀粉酶。
【答案】(1)0.6 (2)70℃水浴锅中15min (4)结果分析:1—7号(以及F)
讨论:①α—淀粉酶溶液中还原糖 ②pH调至3.6以下
【解析】试题分析:(1)制备不同浓度麦芽糖溶液,与斐林试剂生成标准颜色:7个组麦芽糖标准溶液含量不同,为保证7组麦芽糖浓度不同,麦芽糖和水混合后的总量7组是一样的,故第5组(1.4+Z=2.0)求出Z=0.6.
因为萌发的小麦种子既含有α-淀粉酶,也含有、β-淀粉酶。而本实验中测定40℃条件下α-淀粉酶的催化效率,所以需要除去β-淀粉酶。根据α-淀粉酶(在pH3.6以下迅速失活,但耐热)、β-淀粉酶(不耐热,70℃条件下15min后就失活,但耐酸),设定70℃条件下15min后即可去除β-淀粉酶。故70℃水浴锅中15min 。
α-淀粉酶可以水解淀粉生成麦芽糖,E1、E2、E3试管中正是这个水解过程,水解之后通过斐林试剂检测显色反应,再通过与(不同浓度麦芽糖溶液,与斐林试剂生成标准颜色1—7号)对比,即可测定40℃条件下α-淀粉酶的催化效率,故1—7号(以及F)
(4)①因为实验用到的α-淀粉酶溶液是从萌发的小麦种子中制取的,故需要排除α—淀粉酶溶液中还原糖对实验结果的干扰。 ②若要测定β-淀粉酶的活性,需要去除萌发种子中的α-淀粉酶。根据α-淀粉酶(在pH3.6以下迅速失活,但耐热)、β-淀粉酶(不耐热,70℃条件下15min后就失活,但耐酸),故pH调至3.6以下后即可去除α-淀粉酶。
【题目】吸食吗啡等毒品的人群中艾滋病高发,为探究吗啡对HIV的影响,科研人员将某种溶剂配制的三种不同浓度的吗啡分别加入到T淋巴细胞系培养液中,再向培养液加入HIV毒株,实验结果如下图所示。
(1)将培养瓶放在______中培养,定期取细胞培养液离心,检测______中HIV的数量。
(2)实验中对照组的具体操作是:将________加入到T淋巴细胞系培养液中,再向培养液加入HIV毒株。随着HIV感染天数增加,对照组中HIV数量_____。
(3)实验结果表明,三种浓度的吗啡均能________HIV增殖,但是最大浓度(10-8mol/L)吗啡效果却并非最佳,科研人员推测其原因之一可能是高浓度吗啡会_______T淋巴细胞的增殖。
(4)纳洛酮的化学结构与吗啡相似,可用于吗啡成瘾的临床治疗。科研人员进一步研究了纳洛酮对HIV增殖的影响,将不同试剂分别加入到被HIV感染的T淋巴细胞系培养液中,定期检测HIV的含量(10-3g /mL),结果如下表。
组别 | 第3天 | 第4天 | 第5天 | 第6天 |
吗啡组 | 5.59 | 31.73 | 81.77 | 243.0 |
吗啡和纳洛酮组 | 1.96 | 8.11 | 15.36 | 41.23 |
纳洛酮组 | 1.97 | 8.10 | 15.81 | 42.30 |
对照组 | 1.93 | 8.03 | 15.30 | 41.01 |
①该实验中使用的吗啡浓度应为________。
②由实验结果表明,纳洛酮________HIV的增殖,________吗啡对HIV增殖的影响。
【题目】草鱼病毒性出血病是由草鱼呼肠弧病毒(GCRV)引起的,草鱼患病后死亡率非常高,目前尚未找到防治药物,该问题一直是草鱼养殖的“瓶颈”,科学家尝试制备核酸疫苗打破该“瓶颈”,下图是通过基因工程方法将PV7双基因与某质粒连接,并通过草鱼攻毒实验检测免疫保护效果过程示意图。回答下列问题:
草鱼病毒性出血病核酸疫苗实验鱼的死亡率和免疫保护率记录表
组别 | 疫苗注射量 | 实验鱼数 | 死亡鱼数 | 死亡率 | 免疫保护率 |
1 | 10μg | 20尾 | 0尾 | 0 | 100% |
2 | 30μg | 20尾 | 0尾 | 0 | 100% |
3 | 60μg | 20尾 | 1尾 | 5% | 95% |
空载体 | 30μg | 20尾 | 6尾 | 30% | 70% |
对照 | 0 | 20尾 | 20尾 | 100% | 0 |
[注:1.图中P10和P11为启动子,箭头表示转录方向 2.PV71和PV72为草鱼呼肠弧病毒外壳蛋白基因(DNA片段)]
(1)DCRV的遗传物质是双链RNA,可通过设计一对引物,通过
(2)制备草鱼病毒性出血病核酸疫苗时需将PV7双基因与质粒进行连接,将两个PV7基因先后连接到质粒上时切割质粒所使用的限制酶_____(填“相同”或“不同”),这样做的目的有利于____________。
(3)攻毒实验检测是指将不同浓度的核酸疫苗导入草鱼体内,通过转录和翻译产生草鱼呼肠弧病毒外壳蛋白,使草鱼生成抗体和_____细胞,同时给草鱼注入相同浓度的GCRV,统计草鱼免疫保护率,实验结果说明__________,导入空载体(普通质粒)的草鱼免疫保护率到70%,但草鱼体内并未检测到抗体水平的明显增加,可能原因的是_________________。
(4)核酸疫苗注射入草鱼_________后,科学家发现PV7基因在启动子的驱动下持续表达,至第49天核酸疫苗仍没有被降解,仍能检测到PV7基因的转录,综上所述,与常规的基因工程生产的蛋白质疫苗相比,核酸疫苗所具备的优点______________。