题目内容

【题目】萌发的小麦种子中的淀粉酶主要有α-淀粉酶(在 pH<3.6 时迅速失活,但耐热)、β-淀粉酶(不耐 热,70℃条件下 15min 后就失活,但耐酸)。以下是以萌发的小麦种子为原料来测定α-淀粉酶催化效率的实验, 请回答下列与实验相关的问题。

[实验目的]测定 40℃条件下α-淀粉酶的催化效率。

[实验材料]萌发 3 天的小麦种子。

[主要器材]麦芽糖标准溶液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅、试管等。

[实验步骤]

(1)制备不同浓度麦芽糖溶液,与斐林试剂生成标准颜色。取 7 支洁净试管编号,按下表中所示加入试剂,而后 将试管置于 60℃水浴中加热 2min,取出后按编号排序。

表中 Z 代表的数值是。

(2)以萌发的小麦种子制取淀粉酶溶液,将装有淀粉酶溶液的试管置于,取出后迅速冷却,得到α-淀粉酶溶液。

(3)取 A、B、C、D 四组试管分别作以下处理:

(4)将 Al 和 Bl 试管中溶液加入到 E1 试管中,A2 和 B2 溶液加入到 E2 试管中,A3 和 B3 溶液加入到 E3 试管中.C、 D 试管中的溶液均加入到 F 试管中,立即将 E1、E2、E3、F 试管在 40℃水浴锅中保温一段时间。然后分别加入 2mL 斐林试剂,并经过 60℃水浴中加热 2min 后,观察颜色变化。

[结果分析]将 E1、E2、E3 试管中的颜色与试管进行比较得出麦芽糖溶液浓度,并计算出α-淀粉酶催化效率前平均值。

[讨论]

①实验中 F 试管所起的具体作用是排除对实验结果的干扰,从而对结果进行校正。

②若要测定β- 淀粉酶的活性,则需要对步骤二进行改变,具体的操作是将淀粉酶溶液,从而获得β-淀粉酶。

【答案】106 270℃水浴锅中15min 4)结果分析:1—7号(以及F

讨论:①α—淀粉酶溶液中还原糖 ②pH调至36以下

【解析】试题分析:(1)制备不同浓度麦芽糖溶液,与斐林试剂生成标准颜色:7个组麦芽糖标准溶液含量不同,为保证7组麦芽糖浓度不同,麦芽糖和水混合后的总量7组是一样的,故第5组(14+Z=20)求出Z=06

因为萌发的小麦种子既含有α-淀粉酶,也含有、β-淀粉酶。而本实验中测定40℃条件下α-淀粉酶的催化效率,所以需要除去β-淀粉酶。根据α-淀粉酶(在pH36以下迅速失活,但耐热)、β-淀粉酶(不耐热,70℃条件下15min后就失活,但耐酸),设定70℃条件下15min后即可去除β-淀粉酶。故70℃水浴锅中15min

α-淀粉酶可以水解淀粉生成麦芽糖,E1E2E3试管中正是这个水解过程,水解之后通过斐林试剂检测显色反应,再通过与(不同浓度麦芽糖溶液,与斐林试剂生成标准颜色1—7号)对比,即可测定40℃条件下α-淀粉酶的催化效率,故1—7号(以及F

4因为实验用到的α-淀粉酶溶液是从萌发的小麦种子中制取的,故需要排除α—淀粉酶溶液中还原糖对实验结果的干扰。 若要测定β-淀粉酶的活性,需要去除萌发种子中的α-淀粉酶。根据α-淀粉酶(在pH36以下迅速失活,但耐热)、β-淀粉酶(不耐热,70℃条件下15min后就失活,但耐酸),故pH调至36以下后即可去除α-淀粉酶。

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草鱼病毒性出血病核酸疫苗实验鱼的死亡率和免疫保护率记录表

组别

疫苗注射量

实验鱼数

死亡鱼数

死亡率

免疫保护率

1

10μg

20尾

0尾

0

100%

2

30μg

20尾

0尾

0

100%

3

60μg

20尾

1尾

5%

95%

空载体

30μg

20尾

6尾

30%

70%

对照

0

20尾

20尾

100%

0

[注:1.图中P10和P11为启动子,箭头表示转录方向 2.PV71和PV72为草鱼呼肠弧病毒外壳蛋白基因(DNA片段)]

(1)DCRV的遗传物质是双链RNA,可通过设计一对引物,通过_______技术获取大量的PV7基因。

(2)制备草鱼病毒性出血病核酸疫苗时需将PV7双基因与质粒进行连接,将两个PV7基因先后连接到质粒上时切割质粒所使用的限制酶_____(填“相同”或“不同”),这样做的目的有利于____________

(3)攻毒实验检测是指将不同浓度的核酸疫苗导入草鱼体内,通过转录和翻译产生草鱼呼肠弧病毒外壳蛋白,使草鱼生成抗体和_____细胞,同时给草鱼注入相同浓度的GCRV,统计草鱼免疫保护率,实验结果说明__________,导入空载体(普通质粒)的草鱼免疫保护率到70%,但草鱼体内并未检测到抗体水平的明显增加,可能原因的是_________________

(4)核酸疫苗注射入草鱼_________后,科学家发现PV7基因在启动子的驱动下持续表达,至第49天核酸疫苗仍没有被降解,仍能检测到PV7基因的转录,综上所述,与常规的基因工程生产的蛋白质疫苗相比,核酸疫苗所具备的优点______________

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