题目内容
【题目】进入冬季，部分城市出现严重雾霾，与秸秆野外焚烧有一定关系。为破解秸秆处理瓶颈，微生物专家力图通过微生物降解技术使秸秆能尽快腐烂掉，增加土壤肥力。缓解环境污染。试分析并回答有关问题：
（1）专家研制的降解秸秆的催腐剂是十余种能分解纤维素的霉菌、细菌和酵母菌的组合。其中________在细胞结构上与其他两者不同。
（2）从自然界获取纤维素分解菌，采集土样时应选择_______的环境。
（3）微生物专家为从发黑的树干上分离出有分解纤维素能力的高产菌株，制备了选择培养基，将菌液进行一系列_________，从而得到单个菌落， 再采用_________方法进行鉴定，得到下图的菌落。那么，图中降解纤维素能力最强的菌株是____________(填图中序号)。图中所示培养基从物理状态上看，属于_______培养基。
（4）若要保证上图透明圈中均为单个细胞形成的菌落，操作要求是__________________。
（5）分别取0.1mL已稀释103倍的该菌样液，分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到该菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原菌样中该菌的数目为____________。
（6）为探究催腐剂在不同条件下对玉米秸秆的分解作用，将经过灭菌处理的秸秆平分成下表的甲、乙、丙三组，均放在无菌环境条件下进行培养，得到如下实验现象：
组别 | 催腐剂 | 温度/℃ | 实验现象 |
甲 | 无 | 25 | 第25天落叶还没变化 |
乙 | 有 | 25 | 第25天落叶完全腐烂 |
丙 | 有 | 35 | 第18天落叶完全腐烂 |
该实验还存在不完善之处，请你说出其中一点______________________________。
【答案】细菌 富含纤维素 梯度稀释 刚果红染色 ① 固体 菌液稀释度足够高，使纤维素分解菌分散成单个细胞 5.6×108 缺少35度无催腐剂的对照
【解析】
1、纤维素的单体是葡萄糖，纤维素酶能够将纤维素范围葡萄糖，纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，能够产生透明圈的菌落就是纤维素分解菌。
2、微生物培养的关键是无菌操作，微生物培养过程中除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件，需对培养基和培养皿进行消毒，可以通过稀释涂布平板法或显微镜计数法进行统计计数。
3、刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
4、对微生物进行分离、计数常用的接种方法是稀释涂布平板法，估算每毫升样品中的细菌数时，往往选取30～300的平板，取至少三个平板的平均值，每毫升样品中的细菌数=（平板的平均菌落数÷涂布的体积）×稀释的倍数。
（1）霉菌和酵母菌属于真核生物中的真菌，细菌属于原核生物，原核细胞和真核细胞在结构上最主要的区别是原核细胞没有核膜包被的成形的细胞核。
（2）从自然界获取纤维素分解菌，采集土样时应选择富含纤维素的环境。
（3）微生物专家为从发黑的树干上分离出有分解纤维素能力的高产菌株，制备了选择培养基，将菌液进行一系列梯度稀释，从而得到单个菌落，再采用刚果红染色方法进行鉴定。纤维素酶的量越多，活性越强，分解的纤维素越多，透明降解圈越大，所以图中降解纤维素能力最强的菌株是①。图中所示培养基从物理状态上看，属于固体培养基。
（4）若要保证透明圈中均为单个细胞形成的菌落，接种之前将菌液稀释，且稀释度足够高，使纤维素分解菌分散成单个细胞。
（5）如分别取0.1mL已稀释103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到该菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中该菌数=（55+56+57）÷3×103÷0.1×103=5.6×108个。
（6）设计实验应遵循单一变量和对照性原则，分析实验表格可以知道，该实验还存在不完善之处，缺少35度无催腐剂的对照组。
