Question

【题目】乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固化步骤步如下：

(l)筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用____作为培养基中的唯一碳源。从功能上讲，这种培养基属于____。

(2)在倒平板前，宜采用____方法对培养基进行灭菌，筛选该散生物时可用_____ 或释涂布平扳法进行接种。

(3)纯化后的乳糖酶通常可用____法进行蛋白质纯度的鉴定以及检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越____。

(4)乳糖酶宜采用化学结合法（共价链结合法）进行固定化，可通过检测固定化乳糖酶的 _______ 确定其应用价值，而制备固定化细胞一般常采用____。

Answer 1

【答案】乳糖 选择培养基 高压蒸汽灭菌 平板划线法 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 小 （酶）活性【或（酶）活力】 包埋法

【解析】

微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（l）筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用以乳糖作为培养基中的唯一碳源；由于只有能利用乳糖的微生物才能在该培养基上生存，因此从功能上讲，这种培养基属于选择培养基。
（2）对培养基进行灭菌应该采用高压蒸汽灭菌法；接种微生物常用平板划线法或释涂布平扳法。
（3）纯化后的乳糖酶通常可用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行蛋白质纯度的鉴定以及检测其分子量大小：在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越小。
（4）乳糖酶宜采用化学结合法（共价链结合法）进行固定化，可通过检测固定化乳糖酶的（酶）活性确定其应用价值，而制备固定化细胞一般常采用包埋法。