题目内容
【题目】牛奶是微生物生长的良好培养基。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒，以杀死有害微生物。为检测自制酸奶是否被杂菌污染，进行如图所示操作。请回答下列问题。
（1）牛奶用巴氏消毒的好处是_____________。
（2）图中所用培养基在灭菌过程中，需用到高压蒸汽灭菌锅。下面是关于高压蒸汽灭菌锅使用过程中的操作，正确的先后顺序是①②_____________④⑧⑨。（有的操作可以重复）
①装入待灭菌物品②加盖③加热灭菌锅④打开排气阀⑤关闭排气阀⑥切断电源⑦压力表的压力降到零⑧打开盖子⑨取出灭菌物品
（3）取最终的牛奶稀释液0．1mL滴在培养基上进行涂布，应选择的工具是下图中_____________。
（4）图中所示方法为稀释涂布培养法，理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为65个、63个、64个，则可以推测酸奶中每毫升含细菌数为_____________个，运用这种方法统计的结果往往较实际值_____________（偏大/偏小），如果培养基上出现_____________的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。
（5）已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，要进一步分离纯化乳酸菌采用下图所示的划线分离操作，正确的是_____________，其正确操作过程中，划线工具至少要灼烧_____________次。
【答案】牛奶的营养成分不被破坏 ③④⑤⑥⑦④⑧ B 6.4×108 偏小 （形状、大小、颜色、光泽度）不同 B 5
【解析】
灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，适用对象主要有接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等。消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法，适用对象主要有操作空间、某些液体、双手等。
分析题图：图1表示的是稀释涂布平板法，可以用来分离菌种和对菌种进行计数；图2中A为接种环，B为涂布器，C为滴管，D为接种针。
（1）巴氏消毒的方法是指70-75℃煮30分钟或80℃煮15分钟，使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是牛奶的营养成分不被破坏。
（2）高压蒸汽锅灭菌的操作步骤：①装入待灭菌物品，②加盖，③加热灭菌锅，④打开排气阀，⑤关闭排气阀，⑥切断电源，⑦压力表的压力降到零，④打开排气气阀，⑧打开盖子，⑨取出灭菌物品。
（3）将液体菌种滴在培养基上进行涂布的方法是稀释涂布平板法，所用的接种工具是涂布器，即图中的B。
（4）据图分析，图中10mL酸奶稀释了106倍，最后取了10mL稀释液中的0.1mL，且3个培养皿中菌落数分别为65个、63个、64个，因此酸奶中每毫升含细菌数为( 65+63+64 ) ÷3÷0.1×106=6.4×108个。由于经此方法接种培养时，当两个或多个菌落重叠在一起时按一个菌落计算，所以运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小。如果培养基上出现（形状、大小、颜色、光泽度）不同的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。
（5）要进一步分离纯化乳酸菌采用平板划线法进行操作，图中所示的平板划线分离的操作正确的是B图；接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，即图B中的4次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，以防止造成污染，因此完成图B划线共需灼烧接种环5次。
