Question

【题目】下图是某课题小组设计的“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的实验流程示意图。回答下列问题。

(1)微生物接种的方法有很多，该图所示为____法，这一方法常用来统计样品中____________（填“活菌”、“死菌”或“活菌和死菌”）的数目。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 ___的平板进行计数。实验统计的菌落数往往比细菌的实际数目低， 这是因为____。

(2)实验过程中，需对培养基进行灭菌，常用的方法是____。接种操作都应在火焰附近进行，目的是防止____。

(3)对分离得到的分解尿素的细菌作进一步鉴定时，可在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂进行细菌培养。其鉴定原理是____。

Answer 1

【答案】稀释涂布平板 活菌 30—300 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 高压蒸汽灭菌 杂菌污染 分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，指示剂变红

【解析】

稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。

(l)微生物接种的方法有很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，该图所示为稀释涂布平板法，这一方法常用来统计样品中活菌的数目。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30—300的平板进行计数。实验统计的菌落数往往比细菌的实际数目低， 这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

(2)常见的灭菌方法有：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌，实验过程中，需对培养基进行灭菌，常用的方法是高压蒸汽灭菌。接种操作都应在火焰附近进行，酒精灯火焰附近存在无菌区域，目的是防止杂菌污染。

(3)在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。对分离得到的分解尿素的细菌作进一步鉴定时，可在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂进行细菌培养。其鉴定原理是分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，指示剂变红。