Question

【题目】圆褐固氮菌能将大气中的氮气转化为氨，是异养需氧型的原核生物。某同学利用稀释涂布平板法从土壤中分离获得圆褐固氮菌。回答下列问题。

(1)圆褐固氮菌与硝化细菌在同化作用上的最主要区别在于___________。培养圆褐固氮菌时不能隔绝空气，其原因是______________________(答出两点)。

(2)稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，分离不同的微生物需要不同的稀释倍数，原因是_________________________________。

(3)某同学计划统计土壤样液中圆褐固氮菌的总数，他选用稀释倍数进行涂布，每个稀释倍数下都设置了3个培养皿。从对照实验及无菌操作的角度分析，还应设置的一组对照组是___________，设置对照组的目的是___________。

(4)若用固定化酶技术固定圆褐固氮菌产生的固氮酶，和一般酶制剂相比，其优点是___________，且利于产物的纯化；固定化目的菌细胞常用___________法固定化。

Answer 1

【答案】能否将CO2转化为含碳有机物 圆褐固氮菌为需氧型生物，且其需要空气中的氮气作为氮源 （单位体积）土壤中不同种类的微生物数量不同 接种等量无菌水的空白培养基 证明实验操作过程中是否被杂菌污染 可重复利用 包埋

【解析】

常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。

固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。

（1）圆褐固氮菌是异养生物，硝化细菌是自养生物，二者在同化作用上的最主要区别在于能否将CO2转化为含碳有机物。圆褐固氮菌为需氧型生物，且其需要空气中的氮气作为氮源，故培养圆褐固氮菌时不能隔绝空气。

（2）由于土壤中不同种类的微生物数量不同，故分离不同的微生物需要不同的稀释倍数。

（3）为了证明实验操作过程中是否被杂菌污染，应该设置空白对照组，即接种等量无菌水的空白培养基。

（4）若用固定化酶技术固定圆褐固氮菌产生的固氮酶，和一般酶制剂相比，可以重复利用，且利于产物的纯化；体积大的细胞难以被吸附或结合，故固定化目的菌细胞常用包埋法固定化。