Question

【题目】基因工程在育种、疾病预防、疾病治疗等方面都有着非常广阔的应用前景。请回答下列问题：

（1）通过PCR扩增目的基因需要经过变性、___________、延伸三步循环。若目的基因来自嗜热菌(生存环境温度60℃～80℃)，则变性温度更______________(填高或低)，原因是__________________________________________________________________________。

（2）已知A、B两种限制性核酸内切酶的识别序列和切割位点不同，用A和B分别切割质粒和目的基因后，仍可以通过DNA连接酶构建表达载体，原因可能是_____________________。

（3）将重组DNA分子导入植物细胞常用的方法是_________。检测目的基因是否插入受体细胞的DNA中时，采用_________技术。

（4）2017年我国科学家发明了制备流感病毒活疫苗的方法：通过一定方式改造病毒部分基因，将改造基因和_________(填“致病基因”或“表面抗原基因”)等基因构建重组质粒，再将其导入人为改造过的宿主细胞内，产生大量能侵染正常细胞但不具备增殖能力的子代病毒，用于制备疫苗。与灭活疫苗比较，该病毒活疫苗的显著优点之一是可引起_________免疫，增强免疫效果。

Answer 1

【答案】复性 高 嗜热菌生存的环境温度高，则其DNA热稳定性强，解开DNA双螺旋需要的温度高 A、B两种限制酶切割DNA分子产生的黏性末端相同或产生的都是平末端 农杆菌转化法 DNA分子杂交 表面抗原基因 细胞

【解析】

免疫是指身体对抗病原体引起的疾病的能力，特异性免疫包含细胞免疫和体液免疫。疫苗是将病原微生物（如细菌、立克次氏体、病毒等）及其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用转基因等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂。疫苗保留了病原菌刺激动物体免疫系统的特性。当动物体接触到这种不具伤害力的病原菌后，免疫系统便会产生一定的保护物质，如免疫激素、活性生理物质、特殊抗体等；当动物再次接触到这种病原菌时，动物体的免疫系统便会依循其原有的记忆，制造更多的保护物质来阻止病原菌的伤害。

（1）PCR是体外复制DNA的一种技术，需要经过变性（高温解旋）、复性（降温，引物结合）、延伸（合成子链）三步循环。若目的基因来自嗜热菌(生存环境温度60℃～80℃)，嗜热菌生存的环境温度高，则其DNA热稳定性强，解开DNA双螺旋需要的温度高，因此变性温度更高。

（2）A、B两种限制性核酸内切酶的识别序列和切割位点不同，用A和B分别切割质粒和目的基因后，若A、B两种限制酶切割DNA分子产生的黏性末端相同或产生的都是平末端，仍可以通过DNA连接酶构建表达载体。

（3）农杆菌可以侵染植物细胞，将重组DNA分子导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法。检测目的基因是否插入受体细胞的DNA中时，采用DNA分子杂交技术，原理是碱基互补配对。

（4）将改造基因和表面抗原基因构建重组质粒，再将其导入人为改造过的宿主细胞内，产生大量能侵染正常细胞但不具备增殖能力的子代病毒，用于制备疫苗，致病基因表达后毒性大，不能用于制备疫苗。与灭活疫苗（一种物质，不会侵染免疫）比较，该病毒活疫苗的显著优点之一是可引起细胞免疫，增强免疫效果。