题目内容

【题目】对于凝胶色谱柱的装填哪项是错误的 ( )

A. 凝胶充分溶胀后配成凝胶悬浮液,在尼龙管打开的情况下一次性缓慢倒入色谱柱内

B. 色谱柱内一旦发现有气泡产生就必须重装

C. 装填时可轻轻敲打色谱柱,使凝胶装填均匀

D. 当凝胶表面干燥后,用300mL的物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤

【答案】D

【解析】

凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法,相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程长,移动的速度慢,相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道,路程短,移动的速度快,因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。
装填凝胶色谱柱时,色谱柱内不能有气泡存在,因为气泡会扰乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。

凝胶色谱柱的凝胶表面不能干燥,填充完毕后应立即洗涤,故选D。

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