Question

【题目】硝基苯酚是工业污水中重要污染物，某同学欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌。请回答下列有关问题：

（1）为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌，在配制培养基时应选择________（硝基苯酚，硝基苯酚+牛肉膏，硝基苯酚+葡萄糖）作为碳源，不采用其他两组的原因是________________________________。

（2）纯化菌株时划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。分析造成第二划线区域的第一条线无菌落的可能原因是________（答一点即可）。

（3）进行梯度稀释时的一般操作是________________；常用稀释涂布平板法进行活菌计数，其原理是________________，但统计的菌落数往往少于稀释液中的活菌数，原因是________________。

Answer 1

【答案】硝基苯酚 其他两组分别含有其他碳源，不能保证硝基苯酚是唯一碳源 接种环灼烧后未冷却划线（未从第一区域末端开始) 将1mL菌液移入盛有9mL的无菌水中 培养基表面的一个菌落来源于一个活菌 两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落

【解析】

微生物生长繁殖所必需的营养物质主要包括碳源、氮源、水和无机盐等，根据题意，欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌，则需配制以硝基苯酚为唯一碳源的培养基；微生物的培养过程中，常用来分离微生物的方法是稀释涂布平板法和平板划线分离法。

（1）根据以上分析已知，为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌，在配置培养基时应选择硝基苯酚作为唯一碳源，不采用其他两组的原因是其他两组分别含有其他碳源，不能保证硝基苯酚是唯一碳源。

（2）根据题意分析，划线的某个平板经培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落，造成划线无菌落可能的操作失误有：接种环灼烧后未冷却，将菌烫死了；也可能是因为划线未从第一区域末端开始。

（3）进行梯度稀释时的一般操作是将1mL菌液移入盛有9mL的无菌水中；常用稀释涂布平板法进行活菌计数，其原理是培养基表面的一个菌落来源于一个活菌，用于两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落，所以该方法统计的菌落数往往少于稀释液中的活菌数。