Question

【题目】已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：

(1)显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用______________染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用________(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。

(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以________为碳源的固体培养基进行培养。

(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用____________________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用____________________法进行计数。

(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35 ℃、40 ℃、45 ℃温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg，则上述三个温度中，________ ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕________ ℃设计后续实验。

Answer 1

【答案】苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ) 萃取法 油脂 血细胞计数板 稀释涂布平板 45 40

【解析】

植物有效成分的提取可用蒸馏法、压榨法或萃取法，因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取．植物油中不含矿物质元素，只为微生物提供碳源，培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌，测定微生物的数量，可以用显微镜直接计数或稀释涂布平板法。分离出的脂肪酶要对其活性进行检测，以确定其实用价值。

（1）脂肪可被苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）染成橘黄色（红色）故显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染色．因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取。

（2）筛选产脂肪酶的微生物B时，应该使用只有目的菌能够生存的，其他微生物不能生存的选择培养基，培养基中应该添加油脂作为唯一碳源。

（3）测定微生物的数量，可以在显微镜下用血细胞计数板直接计数或稀释涂布平板法进行计数。

（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，45℃条件下该酶活力最小，该酶的最适温度为40℃左右，为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕40℃设计后续实验。