题目内容
【题目】在遗传病及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题。
a链5′—G—G……T—C—3′ 5′—G—G—OH(引物Ⅰ)
b链3′—C—C……A—G—5′ (引物Ⅱ)
95 ℃↓
5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′
55 ℃↓
5′—G—G—OH
5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′
72 ℃↓
(1)在相应的横线上写出引物Ⅱ,并在复性这一步骤中将引物Ⅱ置于合适的位置。__________________
(2)在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA分子。________
(3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P标记,请分析循环一次后生成的DNA分子的特点:________,循环n次后生成的DNA分子中不含放射性的单链占总单链的比例为________。
(4)PCR反应过程的前提条件是________,PCR技术利用了DNA的________原理解决了这个问题。
(5)在对样品DNA分析过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是________。
【答案】 5′—G—A—OH(或HO—A—G—5′)
55 ℃↓
HO—A—G—5′ 5′—G—G—OH
5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′ 3′—C—C……A—G—5′ 5′—G—G……T—C—3′
5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′ 每个DNA分子各有一条链含32P 1/2n DNA解旋 热变性 蛋白酶
【解析】试题分析:PCR全称为聚合酶链式反应,是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。其过程为:①高温变性:DNA解旋过程;②低温复性:引物结合到互补链DNA上;③中温延伸:合成子链.PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶,高温条件下氢键可自动解开。
(1)由图可知,引物Ⅱ为5’-G-A-OH。
(2)循环一次后生成的DNA分子如下:。
(3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P标记,根据DNA半保留复制特点可知,循环一次后,每个DNA分子各有一条链含32P,循环n次后生成的DNA分子中不含放射性的单链占总单链的比例为2/2n+1=1/2n。
(4)PCR反应过程的前提条件是DNA解旋,PCR技术利用DNA的热变性原理解决了这个问题。
(5)在对样品DNA进行分析的过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,根据酶的专一性原理,要去除这些组蛋白可加入蛋白酶。