题目内容
【题目】下图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序,请分析回答下列问题:
(1)步骤一中,向鸡血细胞液中加入________并搅拌,可使鸡血细胞破裂。
(2)步骤二中,过滤后收集含有DNA的___________________。
(3)步骤三、四的操作原理是_____________________________,步骤四通过向溶液中加入________调节NaCl溶液的物质的量浓度,为________mol/L时,DNA将会析出,过滤去除溶液中的杂质。
(4)步骤七:向步骤六过滤后的________中,加入等体积的冷却的________,静置2~3 min,溶液中会出现________色丝状物,这就是粗提取的DNA。
(5)步骤八:DNA遇________试剂,沸水浴5 min,冷却后,溶液呈________色。
【答案】 蒸馏水 滤液 DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质 蒸馏水 0.14 滤液 酒精 白 二苯胺 蓝
【解析】试题分析:DNA粗提取和鉴定的过程:(1)实验材料的选取:凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但是使用DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大。(2)破碎细胞,获取含DNA的滤液:动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可.如果实验材料是植物细胞,需要先用洗涤剂溶解细胞膜.例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。(3)去除滤液中的杂质:方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA;方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。(4)DNA的析出与鉴定:①将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液,静置2~3min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA.用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分;②取两支20ml的试管,各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解.然后,向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。
(1)步骤一中,利用渗透原理,向鸡血细胞液中加入蒸馏水并搅拌,可使鸡血细胞破裂。
(2)步骤二中,过滤后收集含有DNA的滤液。
(3)步骤三、四的操作原理是DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;步骤四通过向溶液中加入蒸馏水调节NaCl溶液的物质的量浓度为0.14mol/L(此时DNA的溶解度最小)时,DNA将会析出,过滤去除溶液中的杂质。
(4)步骤七:向步骤六过滤后的滤液中,加入等体积的冷却的酒精,静置2~3min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA。
(5)步骤八:DNA遇二苯胺试剂,沸水浴5min,冷却后,溶液呈蓝色。
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