Question

【题目】生活饮用水已经过沉淀、过滤、加氯消毒等处理，含微生物很少，但当其水源水不洁或处理达不到要求时，仍然会含相当量的微生物甚至含有致病性微生物。供水管道破损及二次供水等环节也可能导致生活饮用水的污染。因此生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。我国生活饮用水水质标准（GB5749—85）中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/mL，总大肠菌群不得大于3个/L。

（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为_____________。

（2）用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？__________。为什么？_____________________。

（3）如分别取0.1 mL已稀释102倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为161、155、158、170，则每升原水样中大肠杆菌数为_____________。

（4）纯化大肠杆菌时使用的培养基一般用_____________法灭菌，_____________（可/不可）用加入抗生素的方法防止杂菌感染。

（5）如果要测定水中的病毒种类，可以用_____________技术使其遗传物质扩增，然后用___________技术进行鉴定。

Answer 1

【答案】 稀释涂布平板法 需要 因为需要判断培养基是否被污染 1.61×108 高压蒸汽灭菌 不可 PCR DNA分子杂交

【解析】试题分析：（1）先将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量的方法是稀释涂布平板法。

（2）因为要判断培养基是否被污染，需要设置不加稀释水样的对照组。

（3）每升原水样中大肠杆菌数为[1000x102/0.1]x[(161+155+158+170)/4]= 1.61×108个。

（4）微生物培养时，培养基一般用高压蒸汽灭菌；细菌对抗生素敏感，培养基中若加入抗生素会在杀灭杂菌的同时，也会导致大肠杆菌死亡。

（5）病毒的遗传物质是DNA或RNA,体外扩增遗传物质常用PCR技术；鉴定DNA时可用DNA分子杂交，通过是否形成杂交带来确认。