Question

【题目】如图为分离微生物的流程示意图，请据图回答问题：

(1)绝大多数细菌分布在距地表约3～8 cm的土壤层，因此，土壤取样时，一定要铲去________；要分离土壤中分解纤维素的细菌，可以选择____________的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土。

(2)微生物培养时，不同的微生物需要不同的培养温度和时间，细菌一般在___________℃的温度下培养____________天。

(3)若要对分离的细菌做进一步的鉴定，还需借助物理化学的方法：若要鉴定是否有分解尿素的细菌，可以在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂，若指示剂变红，说明培养基的PH升高，这样可以鉴定这种细菌可以分解尿素；若要鉴定是否有分解纤维素的细菌，在长出菌落的培养基上，覆盖________染液，10～15 min后，倒去该染液，再加入1 mol/L的NaCl溶液，加入NaCl溶液的目的是______________，15min后，也倒去该溶液，若菌落的周围出现________，说明此细菌能分解纤维素。

Answer 1

【答案】 表层土壤 富含纤维素 30～37 1～2 酚红 刚果红 洗去未与纤维素结合的刚果红 透明圈

【解析】（1）由于表层土壤相对干燥，小动物分布较少，所以土壤取样时，应先铲去表层土3～8cm左右，再取样；要分离土壤中分解纤维素的细菌，可以选择富含纤维素的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土。

（2）微生物培养时，不同的微生物需要不同的培养温度和时间，细菌一般在30～37℃的温度下培养1～2d；放线菌一般在25～28℃的温度下培养5～7d；霉菌一般在25～28℃的温度下培养3～4d。

（3）分解尿素的细菌能合成的脲酶将尿素分解成了氨气，氨气会使培养基的碱性增强，加入酚红试剂会变红，则说明培养基的PH升高，这样可以鉴定这种细菌可以分解尿素。要鉴定是否有分解纤维素的细菌，在长出菌落的培养基上，覆盖刚果红染液，再加入1 mol/L的NaCl溶液，以洗去未与纤维素结合的刚果红，一段时间后，倒去该溶液，若菌落的周围出现透明圈，说明此细菌能分解纤维素。

比较 项目	土壤中分解尿素的细菌的分离	分解纤维素的微生物的分离
方法	利用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行选择培养	利用纤维素为唯一碳源的选择培养基进行选择培养
原理	只有分解尿素的细菌能够合成脲酶,才能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长	因为培养基中含有丰富的纤维素,因此能够分解纤维素的微生物具有更多的生存机会而大量繁殖
鉴定	在培养基中加入酚红指示剂,指示剂变红说明尿素被分解,从而说明菌落中的菌体为分解尿素的细菌	刚果红染色法，菌落周围出现红色消失的透明圈，该菌落为分解纤维素的微生物菌落