题目内容
【题目】下图为基因工程操作步骤示意图。请回答下列问题：
（1）从基因文库中提取的目的基因通过_____________技术进行扩增。与细胞内同类酶相比，该技术所利用的DNA聚合酶所具有的特点是____________。
（2）在过程①中，需______________酶将已切开的载体DNA与目的基因结合成基因表达载体。载体DNA上必须要有标记基因，标记基因的作用是_______________________。过程②中若选用的受体细胞为大肠杆菌，一般需用Ca2+进行处理，其目的是_______________________。
（3）若将病毒外壳蛋白基因导入酵母菌或哺乳动物细胞中，使之表达出病毒外壳蛋白（抗原），经纯化后而制得的疫苗可用于生产基因工程疫苗，接种基因工程疫苗比接种灭活减毒的病毒疫苗更安全，从疫苗的结构组成来看，其原因是_______________________________________________。
【答案】PCR 耐高温 DNA连接 鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来（或筛选出含目的基因的受体细胞） 使大肠杆菌处于容易吸收周围环境DNA分子的感受态 基因工程疫苗仅具有病毒外壳蛋白，不具有遗传物质，不会出现病毒增殖和感染
【解析】
基因工程的基本步骤：1、目的基因的获取；2、基因表达载体的构建；3、将目的基因导入受体细胞；4、目的基因的检测与鉴定。
（1）通常使用PCR技术对目的基因进行扩增。在PCR技术中应用的关键酶是热稳定DNA聚合酶，其特点是耐高温。
（2）DNA连接酶能将已切开的载体DNA与目的基因连接起来形成磷酸二酯键；标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来；由于未处理的大肠杆菌吸收周围环境DNA分子的能力较弱，所以常用Ca2+处理大肠杆菌，使大肠杆菌处于容易吸收周围环境DNA分子的感受态。
（3）基因工程疫苗不含有遗传物质，可以引发机体发生特异性免疫反应形成抗体和记忆细胞，但由于其不增殖和感染人体，比常规疫苗安全性更高。
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