题目内容

【题目】新冠病毒是RNA病毒,对其进行检测的方法有两种:核酸检测和抗原-抗体杂交检测。下图表示新冠病毒核酸检测的部分流程。

1)以病毒的RNA为模板通过①__________过程合成cDNA,再对cDNA进行PCR扩增,这项技术称为RT-PCR

2)进行RT-PCR需要加入的酶是____________________

3)一次病毒核酸检测历时需16小时,为快速检测可采用抗原-抗体杂交技术,这一技术的关键是要生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体。请将下列生产这种抗体的基本思路补充完整:

①向小鼠体内注射__________,目的是获得能产生特异性抗体的效应B细胞;

②提取免疫小鼠的B淋巴细胞与__________融合,经多次__________获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞;

③将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或注射到__________增殖,从而获得大量的特异性抗体。这种生产抗体的技术称为__________技术。通过这种技术获得的抗体最主要的优点有__________。请举出两例这种抗体在现实中的具体应用:__________

【答案】逆转录(反转录) 逆转录酶 Taq酶(热稳定性强的DNA聚合酶) 新冠病毒的抗原蛋白(或灭活的新冠病毒) 骨髓瘤细胞 筛选 小鼠腹腔内 生产单克隆抗体 特异性强、灵敏度高、并可大量制备 作为诊断试剂、用于治疗疾病和运载药物

【解析】

1、分析题意可知:新冠病毒的遗传物质为RNA,对其进行检测的方法有核酸检测和抗原-抗体杂交检测两种。

2RT-PCR即逆转录-聚合酶链反应。原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶逆转录(反转录)成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于:分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。

1)以病毒的RNA为模板合成cDNA的过程为逆转录(或反转录)。

2)进行RT-PCR需要加入的酶有:进行逆转录所需的逆转录酶和进行PCR所需的Taq酶(热稳定性强的DNA聚合酶)。

3)分析题意可知:抗原-抗体杂交技术关键是要生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体。生产这种抗体的基本思路与生产单克隆抗体的过程相近,具体如下:

①向小鼠体内注射新冠病毒的抗原蛋白(或灭活的新冠病毒),目的是获得能产生特异性抗体的效应B细胞;

②提取免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,经多次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞;

③将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖,从而获得大量的特异性抗体。这种生产抗体的技术称为生产单克隆抗体技术。通过这种技术获得的抗体最主要的优点有特异性强、灵敏度高、并可大量制备。这种抗体在现实中的具体应用有:作为诊断试剂、用于治疗疾病和运载药物。

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