Question

血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O₂和部分CO₂的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。?

（1）将实验流程补充完整：A为                      ，B为                    。凝胶色谱法的基本原理是根据              而达到蛋白质分离的有效方法。?
（2）洗涤红细胞的目的是去除              ，洗涤次数过少，无法除去            ；离心速度过高和时间过长会使                         一同沉淀。达不到分离的效果。洗涤干净的标志是                        。释放血红蛋白的过程中起作用的是                              。?
（3）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液（pH为7．0）的目的是                                                   。如果红色区带                 ，说明色谱柱制作成功。?

（4）右图为填充的凝胶色谱柱，据图回答以下问题：
①自己制作凝胶色谱柱时，在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构由                 替代。
②装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是             。
③洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体         （填“相同”或“不同”），洗脱时，对洗脱液的流速要求是                           。

Answer 1

（1）血红蛋白的释放 样品的加入和洗脱 相对分子质量的大小（2）杂蛋白（血浆蛋白）血浆蛋白 白细胞和淋巴细胞 离心后的上清液中没有黄色 蒸馏水和甲苯（3）准确模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一致 均匀一致的移动（4）①尼龙网和尼龙纱②气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果 ③相同保持稳定

解析