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【题目】哺乳动物成熟的红细胞,在生命科学研究中有着广泛的应用。请回答下列有关问题:

1)哺乳动物成熟的红细胞是由骨髓中的造血干细胞经__________(填“有丝分裂”或“无丝分裂”)和分化形成的。

2)从哺乳动物成熟的红细胞中提取血红蛋白时,首先要用相当于红细胞液体体积五倍的__________洗涤红细胞__________次,然后用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂,释放出血红蛋白。

3)得到血红蛋白混合液之后,可先用离心法进行样品处理及粗分离,再通过_______法或凝胶电泳法进一步纯化。使用前一种方法纯化时,先从色谱柱洗脱出来的是_________(填“大分子”或“小分子”)蛋白质。

4)用凝胶电泳法测定蛋白质分子量时,需要在凝胶中加入SDS,目的是__________,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。

5)因哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和众多的细胞器,常被用作制备细胞膜的材料。与提取血红蛋白不同的是:在制备细胞膜时,红细胞的破裂只能使用______而不能使用__________

【答案】有丝分裂??? 生理盐水??? 3??? 凝胶色谱法??? 大分子??? 消除净电荷对迁移率的影响(或掩盖不同种蛋白间的电荷差别)??? 蒸馏水??? 甲苯???

【解析】

1、哺乳动物成熟的红细胞是由骨髓中的造血干细胞分裂分化形成,细胞内没有细胞核和众多的细胞器,所以常常选做为提取细胞膜的材料;

2、红细胞内血红蛋白的提取和分离一般分为:洗涤→释放→分离→透析→纯化→纯度鉴定。

1)哺乳动物成熟的红细胞是由骨髓中的造血干细胞经有丝分裂和分化形成的。

2)从哺乳动物成熟的红细胞中提取血红蛋白时,首先要用相当于红细胞液体体积五倍的生理盐水洗涤红细胞3次,然后用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂,释放出血红蛋白。

3)得到血红蛋白混合液之后,可先用离心法进行样品处理及粗分离,再通过凝胶色谱法或凝胶电泳法进一步纯化。使用凝胶色谱法纯化时,由于大分子蛋白质无法进入凝胶内部通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快,因此大分子蛋白质先从色谱柱洗脱出来。

4)用凝胶电泳法测定蛋白质分子量时,为了消除净电荷对迁移率的影响(或掩盖不同种蛋白间的电荷差别),需要在凝胶中加入SDS,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。

5)因哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和众多的细胞器,常被用作制备细胞膜的材料。在制备细胞膜时,红细胞的破裂只能使用蒸馏水而不能使用甲苯,因为蒸馏水的作用是让红细胞吸水胀破,而甲苯的作用是溶解细胞膜。

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