题目内容
【题目】[生物--选修一：生物技术实践]
从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。
（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从____________环境采集。
（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物生长的特定环境条件，使其数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对降解苯酚的微生物的富集培养应选择________________的培养基。
（3）如图为分离纯化降解苯酚细菌的部分操作步骤。请回答下列问题：
培养基常用灭菌方法是在温度为______℃条件下，维持15-30min。①是制备培养基时__________中的主要操作。完成步骤④的操作，接种共需要________次的灼烧处理。划线的某个平板经培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_______________________。
（4）培养一段时间后，在培养基表面形成多个单菌落，不同菌株降解苯酚能力有差异，需要做降解能力的性能测定，为选出降解能力强的菌株，具体思路是：________________________________。
（5）获得分解能力强的菌种后，为了临时保存菌种，把菌种接种在试管的___________培养基上，在合适温度下培养，等菌落长成后，再放入4℃冰箱保藏。
【答案】 海滩等高盐 以苯酚为唯一碳源 121 倒平板 6 接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始 用苯酚含量相同的培养液分别培养各菌株，培养相同时间后测定培养液中苯酸含量 固体斜面
【解析】试题分析：本题考查微生物的分离和培养，无菌技术和保藏菌种等相关知识点，特别使用平板划线法接种时，需要注意的细节很多，再结合图中相关信息和题意，就能准确答题。
（1）噬盐菌的菌样应从高盐环境采集，如高盐海滩等。
（2）目的微生物能够产生降解苯酚，说明其碳源是苯酚，筛选菌株时应选择以苯酚为唯一碳源的培养基。
（3）培养基常用高压蒸汽灭菌法，该灭菌方法是在温度为121℃条件下，维持15-30min；①是制备培养基时倒平板中的主要操作；平板划线时，每次划线前都要进行灼烧，最后一次划线结束也要进行灼烧，因此完成步骤④的操作共需要6次的灼烧处理；划线的某个平板经培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始。
（4）选出降解能力强的菌株的方法：用苯酚含量相同的培养液分别培养各菌株，培养相同时间后测定培养液中苯酸含量。
（5）临时保存菌种时要把菌种接种在试管的固体斜面培养基上，在合适温度下培养，等菌落长成后，再放入4℃冰箱保藏。
