题目内容
【题目】对蛋白质的研究与应用,需要从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质。请回答以下关于血红蛋白的提取和分离的问题:
(1)实验材料选用哺乳动物的血液比鸡血更好,理由是___________。为防止血液凝固,在采血器中要预先加入___________。
(2)血液样品离心后,从上往下数的第___________层是血红蛋白的水溶液,是___________色透明液体。透析时使用缓冲液的目的是_________________________________。
(3)在装填凝胶柱时,不得有气泡存在的原因是_________________________________。可以在凝胶柱中加入大分子的有色物质,观察色带移动的情况,如果______________________,说明凝胶色谱柱的性能良好。
(4)判断纯化的蛋白质是否达到要求,最常用的是______________________法鉴定。
【答案】哺乳动物成熟的红细胞没有众多的细胞器和细胞核,血红蛋白含量高且含杂蛋白少 柠檬酸钠 3 红色 维持稳定的pH值,保证血红蛋白结构和功能不变 气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果 红色区带均匀一致地移动 聚丙烯酰胺凝胶电泳
【解析】
血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步,包括:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液,即样品的处理;再经过透析去除分子量较小的杂质,即样品的粗分离;然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去,即样品的纯化;最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。
(1)哺乳动物成熟的红细胞没有各种细胞器和细胞核,血红蛋白的含量较高且提纯时杂蛋白少。柠檬酸钠称为抗凝剂,可以防止血液凝固。
(2)分离血红蛋白溶液:试管中的溶液分为4层:第一层为无色透明的甲苯层,第2层为白色薄层固体,是脂溶性物质的沉淀层,第3层是红色透明液体,这是血红蛋白的水溶液,第4层是其他杂质的暗红色沉淀物。因此血红蛋白混合液在离心管中离心后,从上往下数第3层是红色透析液体即为血红蛋白的水溶液。透析时使用缓冲液的目的是维持稳定的pH值,维持血红蛋白结构和功能不变。
(3)装填凝胶色谱柱时,要注意色谱柱内不能有气泡在,这是因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。在凝胶柱中加入大分子的有色物质,观察色带的移动情况,如果色谱柱中红色区带均匀一致的移动,说明凝胶色谱柱的性能良好。。
(4)判断纯化的蛋白质是否达到要求,可用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定,电泳是指带电离子在电场的作用下发生迁移的过程。
【题目】两个红眼长翅的雌、雄果蝇相互交配,后代表现型及比例如下表。设颜色基因为A、a,长翅基因为B、b,亲本的基因型为 ( )
表现型 | 红眼长翅 | 红眼残翅 | 白眼长翅 | 白眼残翅 |
雌蝇 | 3 | 1 | 0 | 0 |
雄蝇 | 3 | 1 | 3 | 1 |
A.BbXAXa BbXAYB.AaBb AABb
C.AaBb AaBbD.BbXAXA BbXAY
【题目】某生物兴趣小组在验证“土壤微生物对淀粉的分解作用”实验时,将取自某农田的土壤放入里面垫有厚纱布的烧杯中,加水搅拌,然后将纱布连同土壤一起取出。将留在烧杯中的土壤浸出液静置一段时间备用。另取两只烧杯,编号为A、B,进行如下实验:
编号 步骤 | A | B |
①加淀粉糊 | 10mL | 10mL |
②加土壤浸出液 | 30mL | / |
③加蒸馏水 | / | X |
④在室温下放置7天后,加适量的试剂Y摇匀 | ||
⑤观察实验现象 | 不变色 | 变蓝色 |
注:“/”表示不加
(1)步骤①A和B烧杯均加入10mL淀粉糊是为了控制实验中的__________变量。
(2)步骤③中的“X”处应填____________,B烧杯作为实验设计的_________组。
(3)步聚④中的试剂“Y”是__________。
(4)根据实验现象,本实验的结论是:________________________。
【题目】在“观察生长素对植物生长发育的影响”这一探究性学习课题中,某小组同学选用生长素类似物吲哚丁酸(IBA)进行如下子课题实验:
实验步骤:
取同种植物生理状况相同的带芽枝条若干,均分为A、B、C、D、 E五组;
②将五组枝条的下端分别浸泡在下表所示的溶液中,处理1天后,在适宜的环境中培养;
③一段时间后, 。
实验结果:
枝条 | A组 | B组 | C组 | D组 | E组 |
溶液浓度(mol/L) | 清水 | 10-10 | 10-7 | 10-4 | 10-1 |
平均生根数(条) | 11 | 23 | 31 | 31 | 7 |
(1)将实验步骤③补充完整____________________。
(2)写出该子课题的实验名称:__________________。
(3)对照实验一般要设置对照组和实验组,上述实验中的______组 是对照组,____________组是实验组。B组和______组对照可以说明生长素类似物的作用也具有两重性特点。
(4)为进一步得到促进插条生根的最适浓度,请写出接下来的实验思路:___________________________。