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PCR技术是一种DNA的扩增技术。在一定条件下,加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP可以实现DNA的扩增。据此判断不合理的是

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A.dATP在DNA扩增中可以提供能量,同时作DNA合成的原料

B.dTTP完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖

C.DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温的方法破坏氢键,使模板DNA解旋

D.CTP水解脱去两个磷酸基后是组成RNA的基本单位之一

练习册系列答案
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PCR技术是一种DNA的扩增技术,操作步骤简介如下:

第一步:准备反应式溶液和模块DNA。

A.配制聚合酶链式反应溶液:

配方:按如下比例进行配制:蒸馏水100、缓冲溶液15、氯化镁溶液8、引物13、引物23、DNA聚合酶、矿物油1(防止聚合酶在冻结时受伤害);dATP、dGTP、dCTP、dTTP每一种各加5。

B.准备要拷贝的DNA:

提取准备要拷贝的DNA

(如可以用一牙签轻刮口腔内壁,将牙签放入蒸馏水中摇动。加热蒸馏水沸腾,使细胞破碎放出DNA。用离心机离心后,去除蒸馏水中较大的细胞碎片。这时上清液中就有了较纯的DNA。)

第二步:聚合酶链式反应。

①将要拷贝的DNA“B”放入反应液“A”中。

②水浴加热。首先,94 ℃,使DNA双螺旋解旋,历时1 min;然后,56 ℃,使引物结合到DNA上,历时90 s;最后,72 ℃,用聚合酶使DNA拷贝,历时90 s。③重复步骤②。每重复一次,即完成一次拷贝。

分析回答下列问题:

(1)以上材料可以说明(  )

A.DNA的复制必须在活细胞内才能完成

B.DNA能指导蛋白质的合成

C.在合适的条件下,非细胞环境也能进行DNA复制

D.PCR技术是一种无性生殖技术

(2)为什么要加入两种引物。________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

引物的作用是什么?________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(3)PCR技术中用到的DNA聚合酶,取自生长在温泉中的一种细菌,就PCR技术来讲,你认为使用这种细菌中提取的酶较普通的动植物体内提取的DNA聚合酶的优势是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

 

(7分)重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板,通过多次PCR扩增,从而获得目的基因的方法。该技术在扩增较长片段的DNA、不同来源的DNA片段拼接、基因的定点诱变等方面具有广泛的应用前景。右图是利用重叠延伸PCR技术扩增某目的基因的过程。其主要没计思路是用具有互补配对片段的引物(图中引物2、引物3),分别PCR,获得有重叠链的两种 DNA片段,再在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸获得目的基因。结合所学知识,分析下列问题。

(1)引物中G+C的含量影响着引物与模板DNA结合的稳定性,引物中G+C的含量越高,结合稳定性                

(2)在第一阶段获得两种具有重叠片段DNA 的过程中,必须将引物l、2和引物3、4  置于不同反应系统中,这是因为                                                 

(3)引物l、引物2组成的反应系统和引物3、引物4组成的反应系统中均进行一次复制,共产生         种双链DNA分子。

(4)在引物1、引物2组成的反应系统中,经第一阶段形成图示双链DNA至少要经过        次复制。

(5)若利用微生物扩增该目的基因,其基本步骤包括:                          、微生物的筛选和培养、从菌群中获取目的基因。

 

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