Question

【题目】2019年12月1日是第32个“世界艾滋病日”，今年我国宣传活动主题是“社区动员同防艾，健康中国我行动”。近年来人们在已有的技术条件基础I，试图多途径寻找防治艾滋病的最佳方法以期更好地对抗艾滋病。请回答下列相关问题：

（1）途径一：通过单克隆抗体技术制备抗HIV抗体。采集HIV感染自愈者体内相应的免疫细胞，使之与骨髓瘤细胞结合。该途径中HIV感染自愈者的免疫细胞是_______________。上述细胞进行培养时，除了加入常用的各种营养元素外．还需要加入血清和血浆，所需气体主要有O2和CO2，其中CO2的作用是_______________。与从自愈者体内提取抗体相比，该方法获得的抗体的优点是_______________。

（2）途径二：通过转基因技术制备HIV疫苗，该途径中用到的酶有_______________ (至少了两种)。

（3）途径三：科学工作者发现-种蛋白质(D4- lg)，它能与HIV表面的糖蛋白结合，从而使HIV失去侵染T细胞的能力；腺相关病昆是杆状病毒，无激活复制基因，对人体相对安全。腺相关病毒基因组中含有常用病毒衣壳基因rep和复制相关蛋白基因cap，为安全起见，需要去除复制基因。目前，科学家利用其进行相关实验研究．实验工作相关信息如下图4。

图示中最核心的步骤是基因表达载体的构建，该技术中使用的载体是_______________。为使D4-lg基因在感染T细胞中高效表达，需要把D)4-Ig基因片段插入基因表达载体的_______________之间。被图中两种病毒双重感染的T细胞解体的HIV与人侵时相比，差异是_______________。

Answer 1

【答案】浆细胞（或经过免疫的B淋巴细胞） 维持培养液的pH（或酸碱度） 特异性强、灵敏度高、可大量制备 逆转录酶（逆转录酧、DNA聚合酶）、限制酶、DNA连接酶 腺相关病毒（或腺相关病毒粒子或腺相关病毒基因组） 启动子和终止子 HIV的衣壳蛋白已经与D4-Ig蛋白结合，失去再感染T细胞的能力

【解析】

基因工程是狭义的遗传工程，基因工程的基本原理是让人们感兴趣的基因（即目的基因）在宿主细胞中稳定高效地表达。细胞工程是生物工程的一个重要方面。总的来说，它是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法，按照人们的设计蓝图，进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。

（1）途径一是通过制备杂交瘤细胞生产抗HIV抗体。HIV感染自愈者的浆细胞可以产生抗体在培养杂交瘤细胞时，除了加入常用的各种营养元素外，还需要加入血凊和血浆，并保持一定的气体环境（主要有O2和CO2），其中CO2的主要作用是维持培养液的pH。与HIV感染自愈者体内提取的抗体相比，培养杂交瘤细胞所获得抗体的优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备。

（2）途径二是通过基因工程技术获得HIV疫苗，该过程需要用到逆转录酶、限制酶和DNA连接酶。

（3）途径三的技术中，D4-Ig某因的载体是腺相关病毒；为使D4-Ig基因在感染T细胞中高效表达，需要把D4-lg基因片段插入基因表达载体的启动子和终止子之间。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，启动基因的转录。“蛋白质（D4-lg）能与HIV表面的糖蛋白结合，从而使HIV失去侵染T细胞的能力”，因此被两种病毒双重感染的T细胞解体的HIV与入侵时相比，差异是HIV的衣壳蛋白已经与D4-Ig蛋白结合，失去再感染T细胞的能力。