Question

【题目】某质粒上有SalⅠ、Hind Ⅲ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。

（1）在构建重组质粒时，应选用两种限制酶对进行切割，然后进行连接，以保证重组DNA序列的唯一性。
（2）为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加入 ， 理由是。
（3）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用技术，即通过
和两个主要过程最终形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加。

Answer 1

【答案】
（1）SalⅠ和HindⅢ；质粒和抗盐基因的DNA
（2）氨苄青霉素；重组质粒中含抗氨苄青霉素基因而抗四环素基因被破坏
（3）植物组织培养；脱分化；再分化；植物激素(植物生长调节剂或生长素和细胞分裂素)
【解析】（1）在构建重组质粒时，应保证质粒中的标记基因至少保留一个不被破坏，且切割后质粒与目的基因具有2的末端，还要避免质粒自身相连，所以应选用SalⅠ和HindⅢ两种限制酶对质粒和抗盐基因的DNA进行切割，然后进行连接，以保证重组DNA序列的唯一性。（2）为筛选出导入了重组质粒的农杆菌 ，应在培养基中加入氨苄青霉素，理由是重组质粒中含抗氨苄青霉素基因而抗四环素基因被破坏。（3）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用植物组织培养技术，即通过脱分化和再分化两个主要过程最终形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加植物生长调节剂或生长素和细胞分裂素，以诱导再分化的方向。
【考点精析】认真审题，首先需要了解基因工程的原理及技术(基因工程的原理是利用DNA重组技术)．