Question

【题目】金黄色葡萄球菌是一种耐高浓度食盐的致病菌，在自然界中分布广泛，某科研小组对土壤中的金黄色葡萄球菌进行了分离和计数。回答下列问题：

(l)根据培养基的功能分类，加入高浓度的氯化钠的培养基属于____培养基。为防止杂菌污染，常用 ___的方法对培养基灭菌。

(2)向培养基中接种用 ___适当稀释后的土壤浸出液。接种后，需要每隔24h统计一次菌落的数目，这样做的目的是____。

(3)鉴定菌种时，可根据菌落的____（至少答两点）等方而的特征。菌落计数时，一般选取菌落数为____之间的平板，该方法统计的菌落数量比实际活菌数目少，原因是____。

(4)为了长期保存该菌种，可以采用 ___的方法。

Answer 1

【答案】选择 高压蒸汽灭菌 无菌水 防止因培养时间不足而导致遗漏菌落数目 形状、大小、隆起程度和颜色 30-300 当两个或多个细胞连在一起时，平板上只是一个菌落 甘油管藏

【解析】

本题考查微生物的分离和计数，要依据微生物的特征，采用各种方法从含菌样品中获得由单一个体（如单一菌体或孢子）或一段菌丝生长繁殖形成的微生物群体的过程。常用的分离方法有平板划线法，稀释涂布法，平板分离法，稀释倾注平板分离法和单细胞分离法。 平板分离法的基本原理包括两个方面：（1）选择适合于待分离微生物生长条件，如营养、酸碱度、温度和氧的要求或加入某抑制剂造成只利于该微生物生长的环境。（2）微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个细胞繁殖而成的集合体，因此可以通过挑取单菌落而获得一种纯培养（值得指出的是从微生物群体上生长形成的单个菌落可以并不一定保证是纯培养）。

（1）因为金黄色葡萄球菌高浓度食盐，所以在基本培养基中加入高浓度的氯化钠筛选出金黄色葡萄球菌，从功能上讲，此培养基属于选择培养基。常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。

（2）向培养基中接种时要用无菌水适当稀释土壤浸出液后再接种，防止浓度过高、菌落层叠。接种后，需要每隔24h统计一次菌落的数目，这样做的目的是防止因培养时间不足而导致遗漏菌落数目。

（3）鉴定菌种时，可根据菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方而的特征。菌落计数时，一般选取菌落数为30-300之间的平板，该方法统计的菌落数量比实际活菌数目少，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上只是一个菌落，因此对菌液要进行一系列的梯度稀释。

（4）对于需要临时保存的菌种，可采用斜面保藏。对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏。