题目内容
【题目】根据基因工程的有关知识,回答下列问题:
(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有______和_____。
(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:
为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是_____________________。
(3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即_____DNA连接酶和_______DNA连接酶。
(4)反转录作用的模板是________,产物是_______。若要在体外获得大量反转录产物,常采用_________技术。
(5)基因工程中除质粒外,_____和______也可作为运载体。
(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是___________________________________。
【答案】(1)黏性末端 平末端
(2)切割产生的DNA片段末端与EcoRI切割产生的相同
(3)大肠杆菌 T4
(4)mRNA(或RNA) cDNA(或DNA) PCR
(5)噬菌体 动植物病毒
(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱
【解析】试题分析:(1)经限制性核酸内切酶切割后能形成两种类型的末端,即平末端和黏性末端.
(2)为了便于相连,两种不同限制酶切割之后所产生的黏性末端必须相同.
(3)DNA连接酶分为两类:E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶.这二者都能连接黏性末端,此外T4DNA连接酶还可以连接平末端,但连接平末端时的效率比较低.
(4)反转录是以mRNA为模板逆转录先合成单链DNA,再合成双链DNA,利用PCR技术进行大量扩增.
(5)基因工程常用的运载体:质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒.
(6)当受体细胞是细菌时,为了增大导入的成功率,常用Ca2+处理,得到感受态细胞,此时细胞壁和细胞膜的通透性增大,容易吸收重组质粒.未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱.
故答案为:(1)黏性末端 平末端
(2)切割产生的DNA片段末端与EcoRI切割产生的相同
(3)大肠杆菌 T4
(4)mRNA(或RNA) cDNA(或DNA) PCR
(5)噬菌体 动植物病毒
(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱
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