Question

【题目】某生物兴趣小组想通过以下两种方法来检测自来水中大肠杆菌的含量。请根据图中信息回答下列问题：

（1）方法一是通过____________（方法）、方法二是通过____________（方法）来测定自来水中大肠杆菌的含量。

（2）方法一中从不同稀释液中分别取0.1ml菌液滴加到__________________培养基表面，通过统计培养基上____________的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。该方法理论上统计值比实际值________（偏高/偏低），理由是________________________。

（3）方法二中大肠杆菌大小要____________（大于/小于）滤膜的孔径。因此对血浆（某些不耐高温的试剂）可以怎样除菌？________________________。

Answer 1

【答案】 稀释涂布平板法 滤膜法 伊红美蓝 黑色菌落 偏低 两个或多个细胞（大肠杆菌）连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 大于 用滤膜过滤

【解析】【试题分析】本题主要考查稀释涂布平板法和滤膜法的有关知识。稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落；滤膜法是首先将一定量的水体样本注入滤膜过滤，经过抽滤，水中的细菌则被留在滤膜上，将滤膜贴于伊红美蓝培养基上培养，通过计算滤膜上的菌落进而计算出单位样本中的细菌的数量。

（1）据图所示，方法一是用移液管吸取1mL的菌液注入101倍稀释的试管中，然后从101倍稀释液中吸取吸取1mL稀释液，注入102倍稀释的试管中、再将102倍稀释液中吸取1mL稀释液，注入103倍稀释的试管中，此法为稀释涂布平板法；方法二是首先将一定量的水体样本注入滤膜过滤，经过抽滤，水中的细菌则被留在滤膜上，将滤膜贴于伊红美蓝培养基上培养，通过计算滤膜上的菌落进而计算出单位样本中的大肠杆菌的数量，该办法为滤膜法；

（2）大肠杆菌在伊红美蓝培养基培养，当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色，再与美蓝结合形成黑色菌落，方法一中从不同稀释液中分别取0.1ml菌液滴加到伊红美蓝培养基表面，通过统计培养基上的黑色菌落数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。如果两个或多个大肠杆菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此该方法理论上统计值比实际值偏低；

（3）滤膜法是让水中大肠杆菌留在滤膜上，不能从孔中漏下去，故方法二中大肠杆菌要大于滤膜的孔径；因此对血浆（某些不耐高温的试剂）可以用滤膜法除菌。