Question

【题目】高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示，请据图回答有关问题：

（1） 过程①②合称为_________。从功能上看，Ⅰ号培养基属于________；该培养基中必须以________作为唯一碳源。 Ⅱ号培养基的接种方法为_________。

（2）对配制的培养基采用的灭菌方法是__________。

（3）在Ⅰ号培养基上挑出能产生淀粉酶的嗜热菌菌落的鉴别方法是培养基上会出现以该菌的菌落为中心的______________；也可将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如下图所示情况，可判断图中周围_____________的菌落含有所需菌种。

（4）如果高温淀粉酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，则应选择下图中的______________（填写字母）固定化工艺。

Answer 1

【答案】稀释涂布平板法选择培养基淀粉平板划线法高压蒸汽灭菌法透明圈不显蓝色C

【解析】

本实验目的是从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，因此需要配制以淀粉为唯一碳源的选择培养基；图示可见，①过程是梯度稀释；②过程是用涂布平板法进行接种的过程。培养基配制和灭菌过程中，应注意先调节PH，后灭菌，一般培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法，高压蒸汽灭菌法是可以杀灭芽孢在内的所有微生物的一种灭菌方法。部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可产生淀粉酶，分解培养基中的淀粉后会在菌落周围形成透明圈，透明圈越大，说明产生淀粉越多，因此应挑选透明圈大的菌落接种在Ⅱ号培养基上继续培养。

(1)据图分析，从液体菌种到固体平板的过程及结论生长均匀分析，过程①②合称为稀释涂布平板法。按功能分，Ⅰ号培养基为选择培养基，需要使用以淀粉为唯一的碳源；Ⅱ号培养基的接种方法是平板划线法。

(2)对培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法。

(3)根据题意可知，Ⅰ号培养基上会出现以该菌的菌落为中心的透明圈可以鉴别嗜热菌菌落。淀粉与碘液反应呈蓝色，但如果淀粉分解菌中的淀粉酶将淀粉水解后就不能呈蓝色，则会出现无色的透明圈，故图乙所示情况中无蓝色透明圈的菌落含有所需菌种。

(4)据图分析，A是物理吸附法，B是化学结合法，C是包埋法。因为酶容易从包埋材料中漏出，所以一般不使用包埋法；化学结合法可能会对酶活性产生影响，想要酶活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，则应选择图中C。