Question

【题目】近年来研究发现，H5亚型禽流感能突破种间屏障感染人类。因此，在流感疫苗开发中考虑对人流感和禽流感主要亚型进行共预防具有重要意义。科研人员针对人流感病毒H3以及禽流感病毒H5进行了相关研究。

（1）H蛋白是构成流感病毒的主要成分，可以作为____________制成疫苗，接种到小鼠体内，使小鼠产生____________免疫。

（2）研究人员利用p质粒构建p-H5/H3共表达的重组质粒（如下图）。设计思路是：获得H5基因和H3基因，先将H5基因整合到p质粒（仅含有NheⅠ和XhoⅠ酶切位点）上，再将H3基因插入，获得重组质粒。为达到实验目的，需要在目的基因两端引入酶切位点，在H5基因两端需要引入____________酶切位点。

（3）为研究共表达重组质粒的免疫效果，研究人员在第0、21和35天给实验组小鼠注射一定浓度的重组质粒p-H5/H3，对小鼠进行免疫；对照组处理是____________。分别测定实验组和对照组的抗体含量。随着免疫次数的增加，实验组小鼠体内针对H5和H3的抗体浓度迅速增加，说明p-H5/H3免疫后诱导小鼠产生了针对H5和H3的____________免疫。

（4）研究人员分离了实验组小鼠的脾脏淋巴细胞，分别加入____________进行特异性刺激，发现p-H5/H3免疫后T淋巴细胞增殖明显，且产生了大量的干扰素，说明免疫后诱导小鼠产生了____________免疫。

（5）科研人员研制的p-H5/H3 DNA疫苗与传统疫苗相比具有的优点是____________（至少写出两点）。

Answer 1

【答案】 抗原 特异性 NheⅠ、 ClaⅠ和XhoⅠ 将小鼠分三组，在第0、21和35天分别改为注射等量相同浓度的p质粒、p-H5、p-H3进行免疫 体液 H5流感病毒或H3流感病毒 细胞 能实现两种病毒共预防；不具有“减毒”疫苗的危险性（或“安全性更好”）；生产成本低；稳定性好、便于保存

【解析】基因工程的基本工具：分子手术刀”－限制性核酸内切酶（限制酶）、“分子缝合针”－DNA连接酶、“分子运输车”－载体；基因工程的基本操作程序有四步：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

（1）流感病毒结构中的H蛋白可以作为抗原制成疫苗，接种到小鼠体内，使小鼠产生特异性免疫（体液免疫和细胞免疫）。

（2）根据题干信息和图形分析，先将H5基因整合到p质粒上，该质粒上仅含有NheⅠ和XhoⅠ酶切位点，即用NheⅠ和XhoⅠ两种酶切割目的基因构建重组质粒；而将H3基因插入，获得重组质粒需要H5基因右端有ClaⅠ酶，因此需要在H5基因两端需要引入NheⅠ、ClaⅠ、XhoⅠ酶切位点。

（3）为研究共表达重组质粒的免疫效果，研究人员在第0、21和35天给实验组小鼠注射一定浓度的重组质粒p-H5/H3，对小鼠进行免疫；对照实验应遵循单一变量和对照性原则，因此对照组处理是将小鼠分三组，在第0、21和35天分别改为注射等量相同浓度的p质粒、p-H5、p-H3进行免疫，分别测定实验组和对照组的抗体含量；抗体是体液免疫过程中由浆细胞分泌的。

（4）研究人员分离了实验组小鼠的脾脏淋巴细胞，分别加入H5流感病毒或H3流感病毒进行特异性刺激，发现p-H5/H3免疫后T淋巴细胞增殖明显，且产生了大量的干扰素，由于干扰素是由效应T细胞产生的，因此说明免疫后诱导小鼠产生了细胞免疫。

（5）科研人员研制的p-H5/H3DNA疫苗与传统疫苗相比具有能实现两种病毒共预防；不具有“病毒”疫苗的危险性；生成成本低；稳定性好、便于保存等优点。