Question

【题目】基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据图判断下列操作正确的是 （ ）

A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割

C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

D．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

Answer 1

【答案】D

【解析】题图显示：目的基因的左侧存在限制酶Ⅰ的识别序列，右侧有限制酶Ⅱ的识别序列，而且限制酶Ⅱ的识别序列是限制酶Ⅰ识别序列的一部分，所以只有用限制酶Ⅱ才能将目的基因切割下来；若质粒用限制酶Ⅱ切割，则质粒上的两种标记基因GeneI 和GeneⅡ都被破坏，造成重组质粒无标记基因；若用限制酶Ⅰ切割质粒，则GeneⅡ遭到破坏，GeneI的结构完好，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，均为GATC，可以连接形成重组DNA。综上分析，质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割，A、B、C三项均错误，D项正确。