pBR322质粒是基因工程中经常选用的工R具,如图Ⅰ所示。

Ⅰ.目的基因如果插入质粒的某抗性基因中,将使该基因失活。为了检查运载体是否导入原本无Ampr和Tetr的大肠杆菌,将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养,得到如图Ⅱ的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含四环素的培养基上培养,得到如图Ⅲ的结果(空圈表示与Ⅱ对照无菌落的位置)。

(1).pBR322质粒在基因工程中的作用是________。

(2).下图是pBR322质粒上被某种酶识别的一段特定序列。a处被切割后,产生的暴露出来的单链碱基序列是________。如果要从生物细胞中分离目的基因,首先需要进行基因定位,然后再用上述酶切割。将目的基因与质粒连接起来的酶作用于图中的________处。

(3).根据用途,上述I的叙述中所用培养基属于________,与图Ⅲ空圈相对应的图Ⅱ中的菌落表现型是________,由此说明目的基因插入了________中。

Ⅱ.下面是pBR322质粒的部分碱基序列,所编码蛋白质的氨基酸序列为“甲硫氨酸-精氨酸-谷氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-缬氨酸…”(甲硫氨酸的密码子AUG也是起始密码子)。

则:①、②两单链作为转录模板链的是________(填序号),该链转录产生的mRNA顺序是AUG________;如图中箭头所指碱基对G/C缺失,该基因相应片段编码的氨基酸序列为________。

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