题目内容

【题目】紫杉醇是一种高效、低毒、广谱的天然抗癌药物。利用红豆杉细胞培养生产紫杉醇是最有可能解决紫杉醇药源紧缺问题的途径。科学家经过多年研究,终于成功利用生物技术人工合成出大量的紫杉醇。

1)通过_______法和放在_____(较高渗/较低渗)条件下能制备出红豆杉细胞的原生质体。

2)将紫杉醇合成的关键酶基因导入红豆杉原生质体中,再生出细胞壁,与再生细胞壁直接相关的细胞器是________。将转基因成功的细胞作为_________,接种到MS培养基上。在MS培养基中,往往还要添加___________,促进细胞分裂和愈伤组织形成。愈伤组织细胞的特点是____________,并能产生紫杉醇。

3)紫杉醇可以使细胞内的微管蛋白和组成微管的微管蛋白二聚体失去动态平衡,导致细胞在有丝分裂时不能形成______________,进而抑制了细胞分裂和增殖,使癌细胞停止在有丝分裂________, 直至细胞凋亡,起到抗癌作用。

(4) 生物的代谢产物分为初级代谢产物和次级代谢产物。初级代谢产物是生物代谢活动产生的自身生长和繁殖必需的物质;次级代谢产物是生物生长到一定阶段才产生的、对该生物没有明显生理功能,或并非该生物生长和繁殖所必需的物质。结合(3)的信息,你认为紫杉醇是该植物的_____(初级/次级)代谢产物。

【答案】酶解 较高渗 高尔基体 外植体 细胞分裂素和生长素(或“植物激素”) 排列疏松而无规则,高度液泡化的薄壁细胞 纺锤体 次级

【解析】

1、影响植物组织培养的因素:①培养基配制;②外植体选取;③激素的运用;④消毒;⑤温度、pH、光照。
2、植物组织培养中植物激素使用:物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素;同时使用生长素和细胞分裂素时,两者用量的比例影响植物细胞的发育方向;先使用细胞分裂素,后使用生长素,细胞既分裂也分化。

(1)植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,可通过酶解法和放在较高渗条件下制备出红豆杉细胞的原生质体。

(2)高尔基体与植物细胞壁的形成有关。将转基因成功的细胞作为外植体,接种到MS培养基上,生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂,脱分化和再分化的关键性激素,所以在MS培养基中,往往还要添加细胞分裂素和生长素,促进细胞分裂和愈伤组织形成。愈伤组织细胞的特点是排列疏松而无规则,高度液泡化的薄壁细胞,并能产生紫杉醇。

(3)紫杉醇可以使细胞内的微管蛋白和组成微管的微管蛋白二聚体失去动态平衡,导致细胞在有丝分裂时不能形成纺锤体,进而抑制了细胞分裂和增殖,使癌细胞停止在有丝分裂前期, 直至细胞凋亡,起到抗癌作用。

(4)紫杉醇可以使细胞内的微管蛋白和组成微管的微管蛋白二聚体失去动态平衡,导致细胞在有丝分裂时不能形成纺锤体,进而抑制了细胞分裂和增殖,说明紫杉醇并非是该生物生长和繁殖所必需的物质,所以紫杉醇是该植物的次级代谢产物。

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【题目】单克隆抗体在诊断和治疗中具有广泛的应用。已知一般细胞的DNA合成途径有起始合成途径和中间合成途径两种,氨基蝶呤(A)可以阻碍起始合成途经,次黄嘌呤(H)及胸腺嘧啶核苷(T)则是中间合成途径所必需的物质。骨髓瘤细胞只有起始合成途径。在HAT培养基中含有次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)。下面是制备单克隆抗体的基本步骤:

步骤1:对小鼠多次注射特定抗原,制备淋巴细胞。

步骤2:细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养。最后一次免疫后第3天制备脾细胞悬液;筛选出途径缺失的骨髓瘤细胞,于对数生长期(又称指数生长期,即细胞以指数形式增加)制备骨髓瘤细胞悬液;取适量的脾细胞与骨髓瘤细胞进行混合,对它们进行诱导融合处理;用HAT培养基对处理后的细胞进行培养。

步骤3:二次筛选。

步骤4:大规模培养杂交瘤细胞,批量生产单克隆抗体。

回答下列问题:

1)步骤1中对小鼠多次注射特定抗原的目的是________________________;实验所需淋巴细胞可由________________细胞增殖分化而来。

2)于对数生长期制备骨髓瘤细胞悬液的原因是________________________________;为使HAT培养基上只有杂交瘤细胞可以存活,步骤2中应填________

3)步骤3中二次筛选可通过________________________法进行目的抗体的检测,筛选出________________细胞。

4)在体外对杂交瘤细胞进行克隆化培养时,为维持无菌无毒的环境,应进行的操作是_______________________________________________________________________。实验发现,在杂交瘤细胞的体外培养过程中,加入饲养层细胞比不加的生长要好,可能的原因是________________________________________

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