题目内容
【题目】[生物一一选修3：现代生物技术专题]
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图：
(1)在培养上皮细胞时应将其置于含______________的混合气体的培养箱中进行培养。
(2)步骤②中应将上皮细胞与___________细胞通过核移植技术构建出重组细胞。
(3)图中的ES细胞来源于______________。
(4)该治疗需要利用PCR技术扩增出大量的Rag2基因，假设Rag2基因的两条链的引物分别称为引物A和引物B，那么1个Rag2基因通过PCR技术扩增四轮之后，产物中含有引物A的DNA片段所占的比例理论上为_____。某同学设计的一组引物的部分碱基序列为：引物A为...CAGGCT...，引物B为...AGCCTG...，请问这组引物的不合理之处是____________。
(5)步骤④的培养基中应加入____________以诱导ES细胞的分化。
【答案】 95%空气加5%CO2 去核的（MⅡ期的）卵母 (囊胚的）内细胞团 15/16 引物A和引物B会发生（局部）碱基互补配对而失效 分化诱导因子
【解析】试题分析：熟记并理解动物细胞培养、核移植技术、胚胎干细胞、基因工程的基本操作程序等相关的基础知识、形成清晰的知识网络。在此基础上结合题意并从图示中提取信息作答。
(1) 在培养上皮细胞时，为保证细胞培养所需的气体环境，应将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
(2) 在步骤②的核移植过程中，应将上皮细胞与去核的（MⅡ期的）卵母细胞通过核移植技术构建出重组细胞。
(3) 图中的ES细胞来源于(囊胚的）内细胞团。
(4) 1个Rag2基因通过PCR技术扩增四轮之后，得到16个DNA分子，其中不含引物A的DNA片段只有一个，所以产物中含有引物A的DNA片段所占的比例理论上为15/16。某同学设计的一组引物，引物A和引物B中的第3、4个碱基会发生碱基互补配对而导致失效。
(5) 步骤④的培养基中应加入分化诱导因子以诱导ES细胞的分化。
