题目内容
【题目】科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。
（1）不直接将人的凝血因子IX基因导入绵羊胎儿成纤维细胞的原因是______________。由过程①获得的A称为______________。
（2）除转基因动物，通常还可以利用______________生产人凝血因子IX医用蛋白。
（3）在如图所示的过程①～④中，需依赖于碱基互补配对方能完成的是____________。
（4）从下列选项中选出基因工程的操作步骤并排序______________。
①动物细胞融合 ②目的基因与运载体重组 ③显微注射
④重组DNA分子导入受体细胞 ⑤获取目的基因 ⑥细胞核移植
⑦筛选含目的基因的受体细胞
【答案】目的基因很难直接导入受体细胞；即便导入，也会被受体细胞的核酸酶分解 基因表达载体 工程菌 ① ⑤②④⑦
【解析】
本题以图文结合为情境，综合考查学生对基因工程的基本操作程序、基因工程的应用等相关知识的识记和理解能力，以及识图分析能力。
(1) 人的凝血因子IX基因属于目的基因，绵羊胎儿成纤维细胞属于受体细胞。由于目的基因很难直接导入受体细胞，即便导入，也会被受体细胞的核酸酶分解，所以不直接将人的凝血因子IX基因导入绵羊胎儿成纤维细胞。由过程①获得的A称为基因表达载体。
(2)用基因工程的方法，将构建的含人的凝血因子IX基因的表达载体导入微生物细胞中，获得使人的凝血因子IX基因高效率表达的 “工程菌”。可见，利用“工程菌”也能生产人凝血因子IX医用蛋白。
(3) 过程①～④分别表示基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、早期胚胎培养和胚胎移植，其中过程①存在黏性末端连接现象，即存在碱基互补配对现象。
(4)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：一是目的基因的获取；二是基因表达载体的构建，此步骤需要将目的基因与运载体重组；三是将目的基因导入受体细胞，此步骤导入受体细胞的是目的基因与载体结合而成的重组DNA分子；四是目的基因的检测与鉴定。由于并不是所有的受体细胞都能成功导入目的基因，所以在进行目的基因的检测与鉴定时，首先要筛选含目的基因的受体细胞。综上分析，属于基因工程的操作步骤并正确的排序为⑤②④⑦。
