Question

【题目】在肉牛产业中，常在饲料中加入一定量的尿素，因其有瘤胃，在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物以尿素作为唯一氮源。某同学设计了如下实验，对能分解尿素的细菌进行分离和计数。

(1)图中弧线箭头上“?”的具体操作是_______________________________________。

(2)进行培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是___________________；纯化菌种时为了得到单一菌落,常采用的接种方法是_______________________________。

(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_______________。培养后,若出现_________色,说明其中含有能够分解尿素的细菌。

(4)在实验中,当菌落数目稳定时，应选取____________方法计数；研究者每隔24小时统计一次菌落数目,并选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止___________。

Answer 1

【答案】 挑出菌落 先调节pH,后灭菌 平板划线法、稀释涂布平板法 酚红指示剂 红 平板计数 因培养时间不足导致遗漏细菌菌落数目

【解析】据图分析：①过程是从瘤胃菌液中筛选分解尿素的细菌，②过程是扩大培养，③过程是稀释涂布平板法接种，图中“？”目的是挑出符合要求的单菌落。根据Ⅰ号培养基中菌落基本呈均匀分布，说明是采用的是稀释涂布平板法接种；从功能上说，由于要尽量淘汰不能分解尿素的细菌，所以属于选择培养基；根据Ⅱ号培养基中菌落分布呈线型，所以采用的接种方法是平板划线法。

（1）根据前面的分析可知，图中弧线箭头上“？”的具体操作是挑出菌落。

（2）进行培养基配制和灭菌时，为了防止灭菌后在调节PH时被杂菌污染的可能，所以应采取先调节pH，后灭菌。纯化菌种时为了得到单一菌落，常采用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。

（3）鉴定分离纯化的菌种为尿素分解菌，根据尿素分解菌产生的脲酶将尿素分解产生的氨与酚红指示剂显红色的原理，所以可在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养后，若出现红色就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。

（4）在实验中,当菌落数目稳定时，应选取平板计数方法计数；在实验中，研究者每隔24小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足导致遗漏细菌数目。