题目内容
【题目】CTB是霍乱弧菌产生的肠毒素（蛋白质）结构的一部分，可用作针对霍乱弧菌的疫苗．研究人员提取了控制CTB合成的基因（ctb），构建基因表达载体（如图所示），将其导入番茄，然后用转基因番茄饲喂试验小鼠，检测疫苗的有效性．请回答相关问题： 
（1）为了在短时间内获得大量基因，可以采用技术．与细胞内DNA复制时的解旋过程相比，该技术的DNA解链过程有何不同？（写出一点即可．）
（2）使用两种限制酶切割载体可防止切开的载体的两个末端重新连接起来，原因是 ．
（3）可采用方法将基因表达载体导人番茄细胞，然后在加入了的培养基中进行初步筛选，之后还需用方法检测ctb基因是否整合到番茄染色体的DNA上．
（4）提取转基因番茄不同部位的蛋白质进行检测，发现只有果实中含有CTB．ctb基因只能在果实细胞中表达，这与基因表达载体中的有关．
（5）用转基因番茄果实饲喂试验小鼠，若能在小鼠的血清中检测到 ， 则说明该转基因疫苗是有效的．
【答案】
（1）PCR；不需要解旋酶
（2）两种限制酶切割载体可以产生不同的末端
（3）农杆菌转化法；卡那霉素；DNA分子杂交
（4）E8启动子
（5）CTB抗体
【解析】解：（1）PCR技术可在体外大量扩增目的基因；与细胞内DNA复制时的解旋过程相比，该技术的DNA解链过程不需要解旋酶，通过高温变性来实现解旋．（2）两种限制酶切割载体可以产生不同的末端，因此使用两种限制酶切割载体可防止切开的载体的两个末端重新连接起来．（3）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；由图可知，标记基因是卡那霉素抗性基因，因此在加入卡那霉素的培养基中进行初步筛选；检测目的基因是否导入受体细胞常用DNA分子杂交技术．（4）ctb基因只能在果实细胞中表达，这与基因表达载体中的E8启动子有关．（5）转基因疫苗若是有效的，则会表达产生CTB，CTB能引起机体发生免疫反应产生相应的抗体，即CTB抗体． 所以答案是：（1）PCR 不需要解旋酶（2）两种限制酶切割载体可以产生不同的末端（3）农杆菌转化法 卡那霉素 DNA分子杂交（4）E8启动子 （5）CTB抗体
【考点精析】解答此题的关键在于理解基因工程的原理及技术的相关知识，掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术．
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【题目】鸟类的性别决定属于ZW型．某种鸟的羽色受两对基因（A、a和B、b）控制，基因在染色体上的位置如图1所示，基因控制羽色的机理如图2所示．研究者利用甲、乙、丙进行如表所示的实验．回答下列问题： 
组合 | Ⅰ | Ⅱ |
亲代 | 蓝羽♀×绿羽♂ | 黄羽♀×绿羽♂ |
子代 | 白羽♀蓝羽♂ | 白羽♂黄羽♀ |
（1）该鸟羽色的遗传遵循定律．
（2）甲与乙的基因型分别是 ．
（3）正常情况下，丙减数分裂过程中产生的次级卵母细胞中含有W染色体的数量是条．若戊与庚交配，则后代为白羽的概率是 ．
（4）已知图2中酶A的氨基酸排列顺序，但并不能确认基因A转录的mRNA中编码蛋白质的碱基序列，原因是 ．