题目内容

【题目】微生物产生的脲酶能够特异性分解尿素,在农业、食品加工业和污水处理中用途广泛。例如饮料酒在生产过程中会产生少量尿素,酒体呈酸性,厂家常用脲酶分解酒体中的尿素以改善饮料酒的品质,请回答下列问题:

1)从土壤中筛选产脲酶菌时,所配制的培养基以____________为唯一氮源,与固体培养基相比,液体培养基更适于富集培养的原因是________________________

2)在微生物培养过程中,获得纯净培养物的关键是____________。复筛酸性脲酶菌的培养基为中性固体培养基,以酚红为指示剂,在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是__________,在挑选时,应选择____________(选填“有红色圈的菌落”或“无红色圈的菌落”)。

3)在纯化该菌时,为了得到单菌落,常用的接种方法有____________,为了进行计数,某同学吸取菌液lmL稀释1000倍,然后吸取稀释后的菌液02mL,接种于固体培养基上培养。一段时间后观察菌落并计数,实验重复三次,得到三个培养皿中菌落数分别是788874,则该菌的浓度是____________个细菌/mL。若需较长时间保存该菌种,可用的方法是____________

【答案】尿素 培养基与菌体充分接触,菌体繁殖快 防止外来杂菌的入侵 菌液过多会使培养基表面的菌悬液出现积液,导致菌体堆积,影响分离效果 无红色圈的菌落 平板划线法和稀释涂布平板法 4×105 甘油管藏法

【解析】

实验室中目的菌株的筛选
原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度。pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。培养基选择分解尿素的微生物的原理:培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物
方法:能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基,能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。

1)根据分析可知,要从土壤中筛选产脲酶菌时,在配制的培养基时需要以尿素为唯一氮源,从而达到筛选尿素分解菌的目的,与固体培养基相比,液体培养基能使菌体与营养充分接触,从而能更充分的获取营养,进而有利于菌体繁殖,所以液体培养基更适于富集培养。
2)涂布平板时,滴加到培养基表面的菌液量不宜过多,否则会使培养基表面的菌悬液出现积液,导致菌体堆积,无法达到分离效果,在挑选目标菌种时,由于目的菌不能是酚红指示剂变红,因此应选择无红色圈的菌落。
3)在纯化该菌时,为了得到单菌落,可用平板划线法和稀释涂布平板法进行接种,为了进行计数,某同学吸取菌液lmL稀释1000倍,然后吸取稀释后的菌液02mL,接种于固体培养基上培养。一段时间后观察菌落并计数,实验重复三次,得到三个培养皿中菌落数分别是788874,则该菌的浓度为(78+88+84÷3÷0.2×1000=4×105个细菌/mL。若较长时间保存该菌种,通常用甘油管藏法保存。

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