题目内容

【题目】如图所示为培育二倍体转基因抗虫玉米的两种思路。EcoRⅠ、SmaⅠ、BamHⅠ为限制酶(箭头所指为酶切位点)。回答下列问题:

(1)据图,获取目的基因时不能选择SmaⅠ的原因是____。对获取的抗虫基因常采用PCR技术来扩增数量,该过程所依据的原理是____,扩增过程还需要加入____酶。

(2)将基因表达载体导入玉米受精卵时,通常使用____法。

(3)操作4表示____过程,操作⑤常用的方法是____

(4)思路2所用的育种方法是____。与思路1相比,思路2最大优点是获得的转基因抗虫玉米____

【答案】SmaⅠ破坏目的基因的结构 DNA双链复制 耐高温的DNA聚合(Taq酶) 农杆菌转化法 再分化 用一定浓度的秋水仙素处理幼苗 单倍体育种 都是纯合子(或不发生性状分离)

【解析】

本题以图文结合为情境,考查学生对基因工程的基本操作程序、植物组织培养与单倍体育种的过程的相关知识的识记和理解能力,以及识图分析能力。

(1) 题图显示:目的基因中存在SmaⅠ的识别位点。若使用SmaⅠ切割外源DNA,则SmaⅠ会破坏目的基因的结构,因此获取目的基因时不能选择SmaⅠ切割。PCR技术扩增目的基因所依据的原理是DNA双链复制,扩增过程还需要加入热稳定DNA聚合酶(Taq酶)。

(2) 将目的基因导入植物细胞,通常使用农杆菌转化法。

(3) 思路2是将重组质粒导入由花粉经过脱分化形成的愈伤组织中,由该愈伤组织形成的单倍体幼苗2再经过人工诱导,使其染色体加倍,最终得到纯合的玉米株3,因此操作4表示再分化过程,操作⑤常用的方法是用一定浓度的秋水仙素处理幼苗。

(4) 结合对(3)的分析可知,思路2所用的育种方法是单倍体育种。思路1是将重组质粒导入玉米的受精卵中,由该受精卵发育成的植株不一定都是纯合子。可见,与思路1相比,思路2的最大优点是获得的转基因抗虫玉米都是纯合子(或不发生性状分离)。

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(1)稀释菌原液:为确定合适的稀释倍数,小组成员取1 mL菌原液进行如下图所示的操作,在统计菌落时,发现平板上的平均菌落数为40个,则每毫升菌原液中的细菌数大约为____________个。

(2)培养基的准备:在对培养基进行高压蒸汽灭菌的过程中,完成加水、装锅、加热排气、保温保压适当时间后,切断热源,让灭菌锅内温度自然下降,当压力表的指针______时,打开排气阀,旋开固定螺栓,开盖,才可以取出灭菌的培养基等物品。待培养基冷却至____(填温度)左右时倒平板,将平板倒置的目的是____________。在培养基凝固之前加入灭菌的刚果红,从功能上来看,该培养基属于__________(“选择”或“鉴别”)培养基,培养基中碳源主要是____________。 

(3)接种与观察:在无菌条件下,用移液枪取0.1 mL稀释后的菌悬液进行图1中_____所示的操作,室温放置2~3分钟后倒置于恒温箱中培养,使菌液完全被培养基吸收。培养过程中定期观察菌落特征和透明圈的大小,图2中D/d的值越_______,表示该菌对纤维素分解能力越强。

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