题目内容
【题目】刚果红能够与纤维素形成红色复合物，可用其鉴定纤维素分解菌。某研究小组将滤纸埋在土壤中，30天后从滤纸上取部分土壤样品加入生理盐水中溶解，得到了富有纤维素分解菌的菌原液，并进行如下实验。回答下列问题：
（1）稀释菌原液：为确定合适的稀释倍数，小组成员取1 mL菌原液进行如下图所示的操作，在统计菌落时，发现平板上的平均菌落数为40个，则每毫升菌原液中的细菌数大约为____________个。
（2）培养基的准备：在对培养基进行高压蒸汽灭菌的过程中，完成加水、装锅、加热排气、保温保压适当时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的指针______时，打开排气阀，旋开固定螺栓，开盖，才可以取出灭菌的培养基等物品。待培养基冷却至____（填温度）左右时倒平板，将平板倒置的目的是____________。在培养基凝固之前加入灭菌的刚果红，从功能上来看，该培养基属于__________（“选择”或“鉴别”）培养基，培养基中碳源主要是____________。
（3）接种与观察：在无菌条件下，用移液枪取0.1 mL稀释后的菌悬液进行图1中_____所示的操作，室温放置2～3分钟后倒置于恒温箱中培养，使菌液完全被培养基吸收。培养过程中定期观察菌落特征和透明圈的大小，图2中D/d的值越_______，表示该菌对纤维素分解能力越强。
【答案】4106 降为零 50℃ 防止冷凝水滴入培养基，造成污染 鉴别 纤维素 甲 大
【解析】
由题文描述和图示分析可知：该题考查学生对微生物的实验室培养、分解纤维素的微生物的分离等相关知识的识记和理解能力，以及识图分析能力。
(1)依题意和图示分析可知：取1mL菌原液稀释104倍，之后取0.1mL稀释后的菌液进行接种并平板培养。在统计菌落时，发现平板上的平均菌落数为40个，则每毫升菌原液中的细菌数大约为40÷0.1×104＝4×106个。
(2) 在对培养基进行高压蒸汽灭菌的过程中，到灭菌时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的指针降为零时，打开排气阀，旋开固定螺栓，开盖，取出灭菌的培养基等物品。待培养基冷却至50℃左右时倒平板。为了防止冷凝水滴入培养基，造成污染，待平板冷却凝固后需将平板倒过来放置。由题意“刚果红能够与纤维素形成红色复合物，可用其鉴定纤维素分解菌”可知：在培养基凝固之前加入灭菌的刚果红，从功能上来看，该培养基属于鉴别培养基。欲鉴定纤维素分解菌，其培养基中应以纤维素为唯一碳源。
(3)在无菌条件下，用移液枪取0.1 mL稀释后的菌悬液，应对其进行图1中甲所示的涂布平板操作。刚果红可与纤维素形成红色复合物，但并不和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖发生颜色反应；当纤维素被纤维素酶水解后，刚果红-纤维素复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，透明圈越大，说明纤维素分解菌降解纤维素的能力最强。图2中的D为透明圈的直径，d为菌落的直径，可见，D/d的值越大，表示该菌对纤维素分解能力越强。
