题目内容

【题目】为了提取当地环境中的独特菌种,某研究小组以优质高粱、上等小麦为原料,制作培养基,搜集、分离空气中的微生物。他们还尝试制作其他一些发酵产品。请回答下列问题:

1)培养基在接种微生物前,必须先进行________(灭菌方式),培养基按照用途分成________培养基和_________培养基。

2)将上述培养基暴露在空气中培养一段时间后,取10g该培养基,用无菌水制成100mL样品溶液,再将样品溶液稀释103倍后,各取样品溶液01 mL5个细菌培养基平板上接种,培养一段时间后,平板上长出的细菌菌落数分别为13156462178191。该过程采取的接种方法是________,每克培养基样品中的细菌数量为______×107个;与血细胞计数板相比,此计数方法测得的细菌数目较实际值____,原因是___________________________

3)制作葡萄果酒的主要微生物是_______,其代谢类型是_______,其产物乙醇与______________试剂反应呈现灰绿色,这一反应可用于乙醇的检验。

4)如果把葡萄果酒制成葡萄果醋,要适时进行充气,因为醋酸菌将酒精变成醋酸时需要______的参与。

5)制作泡菜时,应选用火候好、无裂纹、无砂眼的泡菜坛,坛盖边沿的水槽应注满水,并且要时常补充水槽中的水,因为乳酸菌需要______的环境。泡菜坛内有时会长一层白膜,这层白膜主要是由_______的繁殖造成的。

【答案】高压蒸汽灭菌 选择 鉴别 稀释涂布平板法 175 两个菌落重叠长在一起 酵母菌 异养兼性厌氧型 重铬酸钾 氧气 无氧 酵母菌

【解析】

1、用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时,在每一个梯度浓度内,至少要涂布3个平板,选择菌落数在30300的进行记数,求其平均值,再通过计算得出土壤中细菌总数。
2酵母菌是一种单细胞真菌,在有氧和无氧的条件下都能生存,属于兼性厌氧菌,因此便于用来研究细胞呼吸的不同方式。CO2可使澄清石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短,可以检测酵母菌培养CO2的产生情况。橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件下与乙醇(酒精)发生化学反应,在酸性条件下,变成灰绿色。

1)培养基在接种微生物前,必须先进行灭菌,对培养基一般使用高压蒸汽灭菌。该培养基是以优质高粱、上等小麦为原料制作的,目的是搜集、分离空气中的微生物,按用途分该培养基属于选择培养基。
2)用于计数细菌菌落数的常用接种方法是稀释涂布平板法,统计的菌落数应介于30300之间,故选择细菌菌落数为156178191的平板计数。每克该土壤样品中的菌落数为(156+178+191÷3÷0.1×100÷10×103=1.75×107,由于两个或多个菌体未分离形成一个菌落时,往往统计的是一个菌落,所以用此计数方法测得的细菌数较实际值偏少。
3)酿酒的主要微生物是酵母菌,其代谢类型是异养兼性厌氧型,其产物乙醇与酸性重铬酸钾试剂反应呈现灰绿色。
4)醋酸菌为需氧型,所以若把葡萄果酒制成葡萄果醋,要适时进行充气。
5)乳酸菌为厌氧型,制作泡菜时需要创造无氧的环境。泡菜坛内有时会长一层白膜,这层白膜主要是由酵母菌的繁殖造成的。

练习册系列答案
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【题目】阅读下面的材料,回答问题

胰岛素的应用是糖尿病治疗历史上的一个里程碑。胰岛素自1922年用于临床以来,就成为治疗糖尿病的特效药物。目前全世界糖尿病患者已超过四亿,为临床提供充足、质量可靠的胰岛素制剂是现代生物制药领域的一项重要工程。

人胰岛素由胰岛 β 细胞合成,核糖体上最初形成的是前胰岛素原单链多肽,进入内质网腔后,信号肽被切除,形成胰岛素原。高尔基体内的特异性肽酶将胰岛素原的 C 肽区域切除,A 链和 B 链通过二硫键形成共价交联的活性胰岛素(如图)。

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最初用于临床的胰岛素几乎都是从猪、牛胰脏中提取的。猪、牛胰岛素与人胰岛素生理功能相似,但氨基酸序列有微小差异。接受动物胰岛素治疗的患者有5%~10%出现不同程度的过敏反应,抗动物胰岛素抗体还可能对患者的胰岛 β 细胞功能产生负面影响。

随着基因工程技术的发展,重组人胰岛素逐渐取代动物胰岛素。早期的重组人胰岛素生产,采用AB链分别表达法。后来该方法被胰岛素原表达法取代,即由大肠杆菌合成胰岛素原,然后经细胞外酶切获得胰岛素。1987年用酵母菌生产重组人胰岛素的方法出现。重组人胰岛素的结构与人体自身分泌的胰岛素结构完全相同,但无法完全模拟生理胰岛素曲线,容易导致血糖波动,甚至导致低血糖发生。

上世纪90年代,科学家通过改变胰岛素的氨基酸序列和结构,研制出能更好模拟生理胰岛素分泌特点的胰岛素类似物,包括速效胰岛素和长效胰岛素类似物。例如,将人胰岛素 B 链第28位的脯氨酸替换为天门冬氨酸,可有效抑制胰岛素单体的聚合,皮下注射这种速效胰岛素类似物后,起效快(10-20分钟起效)、血药浓度峰值高、药效消失快,已经在临床上广泛应用。

1)用猪胰岛素进行治疗,易诱导人体产生抗猪胰岛素抗体,原因是_____

2)人胰岛素基因有 2 个内含子。利用大肠杆菌通过胰岛素原法生产重组人胰岛素,获取目的基因时,不宜采用的方法是_____

a.直接从细胞内总 DNA 中分离目的基因

b.用化学方法直接人工合成目的基因

c.以 mRNA 为模板逆转录合成目的基因

d.利用 PCR 扩增人胰岛素原基因的编码序列

3)与大肠杆菌相比,利用酵母菌生产胰岛素的优势有_____

4)重组人胰岛素工程菌构建完成后,还需要通过_____工程技术进行胰岛素的生产。

5)正常人胰岛素的生理性分泌,可分为基础胰岛素分泌(24小时持续脉冲式分泌微量胰岛素,维持空腹状态下血糖稳定)和进餐后的胰岛素分泌。能更好地模拟餐时生理胰岛素曲线的是_____(选填速效或长效)胰岛素类似物。

6)请写出通过蛋白质工程,构建胰岛素类似物工程菌的基本过程_______________________

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